附件：革蘭陰性桿菌鑒定試劑注冊指導(dǎo)原則（2024年第19號(hào)）.doc

革蘭陰性桿菌鑒定試劑注冊審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對革蘭陰性桿菌鑒定試劑注冊申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門審評(píng)注冊申報(bào)資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對革蘭陰性桿菌鑒定試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報(bào)資料內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是供注冊申請人和技術(shù)審評(píng)人員使用的指導(dǎo)性文件，但不包括審評(píng)審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料，相關(guān)人員應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系不斷完善及科學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

本指導(dǎo)原則適用于利用生化鑒定原理，鑒定臨床醫(yī)學(xué)相關(guān)的需氧型、兼性厭氧型、厭氧型革蘭陰性桿菌的試劑（革蘭陰性桿菌及其鑒定簡介見附件）；檢測樣本為從臨床樣本中分離的純菌。

對于其他方法，可能部分要求不適用或本文所述內(nèi)容不夠全面，申請人可以根據(jù)產(chǎn)品特性對適用部分進(jìn)行評(píng)價(jià)或補(bǔ)充其他的評(píng)價(jià)資料進(jìn)行相應(yīng)性能的驗(yàn)證，但需闡述不適用的理由，并說明替代方法的科學(xué)合理性。

二、注冊審查要點(diǎn)

（一）監(jiān)管信息

1.產(chǎn)品名稱及分類編碼

產(chǎn)品名稱應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》及相關(guān)法規(guī)的要求。根據(jù)《體外診斷試劑分類子目錄》，該產(chǎn)品按照第二類體外診斷試劑管理，分類編碼為6840。

2.其他資料包括產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報(bào)前與監(jiān)管機(jī)構(gòu)的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。

（二）綜述資料

綜述資料主要包括概述、產(chǎn)品描述、預(yù)期用途、申報(bào)產(chǎn)品上市歷史以及其他需要說明的內(nèi)容。

1.概述

1.1通用名稱及確定依據(jù)

根據(jù)《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》要求，體外診斷試劑的產(chǎn)品名稱一般由被測物質(zhì)名稱、用途和方法/原理三部分組成，例如：本產(chǎn)品被測物為革蘭陰性桿菌，用途為鑒定試劑（盒）或鑒定板/卡，檢測方法/原理為生化法（包括比色法、比濁法），據(jù)此確定產(chǎn)品的通用名稱為革蘭陰性桿菌鑒定試劑盒（比色法/比濁法）或革蘭陰性桿菌鑒定板/卡（比色法/比濁法）。

1.2描述申報(bào)產(chǎn)品預(yù)期用途。

一般根據(jù)細(xì)菌對氧氣的耐受性或鏡下形態(tài)，將預(yù)期用途表述為：

本產(chǎn)品用于需氧型革蘭陰性桿菌的鑒定。

本產(chǎn)品用于兼性厭氧型革蘭陰性桿菌的鑒定。

本產(chǎn)品用于需氧和兼性厭氧型革蘭陰性桿菌的鑒定。

本產(chǎn)品用于厭氧型革蘭陰性桿菌的鑒定。

本產(chǎn)品用于革蘭陰性桿菌的鑒定。

申請人可依據(jù)產(chǎn)品所涵蓋的革蘭陰性桿菌的具體特征對預(yù)期用途進(jìn)行聲稱。

1.3如適用，描述有關(guān)申報(bào)產(chǎn)品的背景信息概述或特別細(xì)節(jié)，如：申報(bào)產(chǎn)品的歷史概述、歷次提交的信息，與其他經(jīng)批準(zhǔn)上市產(chǎn)品的關(guān)系等。

2.產(chǎn)品描述

2.1產(chǎn)品綜述

2.1.1描述產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理，產(chǎn)品組成，原材料的來源及制備方法，主要生產(chǎn)工藝，檢驗(yàn)方法。

注：技術(shù)原理包括反應(yīng)原理（如生化法），方法學(xué)（如比色法/比濁法），信號(hào)處理方法，結(jié)果解讀方式等。

2.1.2描述產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評(píng)價(jià)，包括分析性能評(píng)估、陽性判斷值、穩(wěn)定性及臨床評(píng)價(jià)等。

2.1.3描述不同包裝規(guī)格之間的差異。

2.1.4描述產(chǎn)品中使用的生物材料或衍生物（如適用）的生物學(xué)來源（如人、動(dòng)物、病原體、重組或發(fā)酵產(chǎn)物）和（或）組織來源（如血液）。人源性材料（如適用）須對有關(guān)傳染病（HIV、HBV、HCV等）病原體檢測予以說明；其他動(dòng)物源及微生物來源的材料，應(yīng)當(dāng)說明其在產(chǎn)品運(yùn)輸、使用過程中對使用者和環(huán)境是安全的，并提供相關(guān)的文件。

2.2包裝描述

描述試劑盒的各個(gè)組分、所有規(guī)格及不同規(guī)格的劃分說明，試劑盒組分、外包裝及組分包裝所用的材質(zhì)、包裝的形狀，外包裝盒上面應(yīng)包含產(chǎn)品名稱、批號(hào)、生產(chǎn)日期及失效日期、注冊人/生產(chǎn)企業(yè)名稱、生產(chǎn)地址、聯(lián)系方式等信息。

2.3研發(fā)歷程

闡述申請注冊產(chǎn)品的研發(fā)背景和目的。如有參考的同類產(chǎn)品或前代產(chǎn)品，應(yīng)當(dāng)提供同類產(chǎn)品或前代產(chǎn)品的信息，并說明選擇其作為研發(fā)參考的原因。

2.4與同類和/或前代產(chǎn)品的比較

對已有同類產(chǎn)品和/或前代產(chǎn)品上市，申請人應(yīng)提供其產(chǎn)品名稱、生產(chǎn)企業(yè)、注冊情況，并列表比較申報(bào)產(chǎn)品與同類產(chǎn)品和/或前代產(chǎn)品在技術(shù)原理、預(yù)期用途、使用方法、性能指標(biāo)、臨床應(yīng)用情況等方面的異同。

3.預(yù)期用途及使用環(huán)境

3.1明確產(chǎn)品預(yù)期用途，寫明適用儀器（如適用）、使用方法（自動(dòng)/半自動(dòng)/手工）、檢測類型（定性）、樣本類型（來源于臨床樣本分離的純菌）等。

3.2臨床適應(yīng)證、適用人群

臨床上，革蘭陰性桿菌引起的感染呈多樣性，究其原因?yàn)榘募?xì)菌種類廣泛，感染部位不同，病原菌的種類也千差萬別，如細(xì)菌血流感染常檢出的菌株有大腸埃希菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌等；呼吸道感染常檢出的菌株有鮑曼不動(dòng)桿菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌等；腸道感染常檢出的菌株有痢疾志賀菌、大腸埃希菌、傷寒沙門菌；泌尿道感染常檢出的菌株有大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌等；傷口膿液常檢出的菌株有大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌等；顱內(nèi)感染常檢出的菌株有鮑曼不動(dòng)桿菌、銅綠假單胞菌等。

寫明產(chǎn)品需專業(yè)人員使用。明確產(chǎn)品在實(shí)驗(yàn)室中使用，如有可能會(huì)影響其安全性和有效性的環(huán)境條件（如溫度、濕度、海拔）應(yīng)注明。

4.申報(bào)產(chǎn)品上市歷史：如適用，應(yīng)當(dāng)提交申報(bào)產(chǎn)品的下列資料：上市情況、不良事件和召回、銷售/不良事件及召回率。

5.其他需說明的內(nèi)容

5.1除申報(bào)產(chǎn)品外，檢測系統(tǒng)的其他組成部分，包括但不限于：適用儀器、質(zhì)控菌株、獨(dú)立軟件等基本信息，及其在檢測中發(fā)揮的作用，必要時(shí)應(yīng)提交相應(yīng)的說明書。

5.2如適用，對于已獲得批準(zhǔn)的檢測系統(tǒng)的其他組成部分，應(yīng)當(dāng)提供注冊證編號(hào)和國家藥監(jiān)局官方網(wǎng)站公布的注冊證信息。

（三）非臨床資料

1.產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)管理資料 

申請人應(yīng)考慮產(chǎn)品壽命周期的各個(gè)環(huán)節(jié)，從預(yù)期用途、可能的使用錯(cuò)誤、與安全性有關(guān)的特征、已知可預(yù)見的危害等方面的判定，以及對患者風(fēng)險(xiǎn)的估計(jì)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分析，應(yīng)符合GB/T 42062《醫(yī)療器械風(fēng)險(xiǎn)管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》的要求。

風(fēng)險(xiǎn)管理資料應(yīng)包含以下內(nèi)容：

1.1概述：簡要介紹風(fēng)險(xiǎn)管理資料的編制依據(jù)、適用范圍、產(chǎn)品描述（名稱、用途、適用機(jī)型）、風(fēng)險(xiǎn)管理計(jì)劃及實(shí)施情況等。

1.2風(fēng)險(xiǎn)管理人員及其職責(zé)分工：明確風(fēng)險(xiǎn)管理小組成員及職責(zé)，制定風(fēng)險(xiǎn)管理流程圖，明確風(fēng)險(xiǎn)管理活動(dòng)的評(píng)審要求等。

1.3風(fēng)險(xiǎn)來源分析：明確風(fēng)險(xiǎn)可能的來源（如產(chǎn)品故障、使用條件或環(huán)境差異、用戶端風(fēng)險(xiǎn)、產(chǎn)品壽命等）。

1.4預(yù)期用途和安全性有關(guān)特征的判定：以GB/T 42062附錄C為基礎(chǔ)，判定產(chǎn)品預(yù)期用途和與安全性有關(guān)的特性，判定已知和可預(yù)見的危害、對患者風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估，并形成問題清單。申請人可以根據(jù)產(chǎn)品特征確定其他可能危害，采取相應(yīng)控制措施，確保產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)降至可接受的程度。

1.5風(fēng)險(xiǎn)分析、風(fēng)險(xiǎn)控制和風(fēng)險(xiǎn)控制措施：對每一判定為危害的不正確結(jié)果的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行分析，并制定相應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)控制方案及措施。

1.6綜合剩余風(fēng)險(xiǎn)的可接受性評(píng)價(jià)：對比采取風(fēng)險(xiǎn)控制措施前后的風(fēng)險(xiǎn)情況，對剩余風(fēng)險(xiǎn)的可接受性進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1.7風(fēng)險(xiǎn)控制措施驗(yàn)證：對風(fēng)險(xiǎn)控制措施的有效性進(jìn)行驗(yàn)證分析。

2.體外診斷試劑安全和性能基本原則清單

申請人需提供《體外診斷試劑安全和性能基本原則清單》，并說明產(chǎn)品為了符合適用的各項(xiàng)要求所采用的方法，以及證明其符合性的文件。對于不適用的各項(xiàng)要求，應(yīng)說明理由。

3.產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗(yàn)報(bào)告

3.1產(chǎn)品技術(shù)要求

產(chǎn)品技術(shù)要求根據(jù)《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》等規(guī)范性文件進(jìn)行編制。產(chǎn)品技術(shù)要求主要包含包裝規(guī)格及其劃分說明、性能指標(biāo)和檢驗(yàn)方法，性能指標(biāo)主要包括外觀、準(zhǔn)確性、重復(fù)性、批間差、pH值（如適用）、裝量（如適用）等。

3.2檢驗(yàn)報(bào)告

在保證產(chǎn)品原材料和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定可靠的基礎(chǔ)上，采用在符合醫(yī)療器械質(zhì)量管理體系相關(guān)要求的條件下生產(chǎn)的產(chǎn)品進(jìn)行檢驗(yàn)?？商峤灰韵氯我恍问降臋z驗(yàn)報(bào)告：

3.2.1具有自檢能力的注冊申請人出具的注冊自檢報(bào)告，自檢應(yīng)符合《醫(yī)療器械注冊自檢管理規(guī)定》。

3.2.2委托有資質(zhì)的醫(yī)療器械檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的檢驗(yàn)報(bào)告。

4.分析性能研究

申請人應(yīng)采用在生產(chǎn)質(zhì)量管理體系下生產(chǎn)的試劑對分析性能進(jìn)行研究，應(yīng)當(dāng)包括研究方案、數(shù)據(jù)、結(jié)果分析和總結(jié)，提供證據(jù)的總結(jié)及證據(jù)充分性的論證。

如申報(bào)產(chǎn)品適用不同的機(jī)型，需要提交在不同機(jī)型上進(jìn)行評(píng)估的資料。如申報(bào)產(chǎn)品包含不同的包裝規(guī)格，需要對各包裝規(guī)格進(jìn)行分析或驗(yàn)證：若存在性能差異，需采用每個(gè)包裝規(guī)格產(chǎn)品進(jìn)行性能評(píng)估；若不存在性能差異，需要詳細(xì)說明各規(guī)格間的差別及可能產(chǎn)生的影響。

分析性能研究中使用的菌株建議不超過5代，并對其來源進(jìn)行說明。

建議著重對以下性能進(jìn)行研究：

4.1適用的樣本類型與樣本穩(wěn)定性

本產(chǎn)品適用的樣本類型為臨床分離的純菌，為了保證待測菌的活性，臨床采樣后，建議立即接種純化菌，應(yīng)對制備的菌懸液及純化后菌株的保存條件、保存期限和接種濃度進(jìn)行研究。

4.2 pH值（如適用）

根據(jù)產(chǎn)品特點(diǎn)，如培養(yǎng)基未包被在固體載物中時(shí)，鑒定培養(yǎng)液或鑒定稀釋液對pH有特殊要求時(shí)，需要限定pH值，用pH計(jì)測定，結(jié)果應(yīng)符合申請人設(shè)定的pH范圍。

4.3準(zhǔn)確性

根據(jù)試劑板條鑒定范圍，選取不少于2株的菌株進(jìn)行準(zhǔn)確性試驗(yàn)，菌株可使用標(biāo)準(zhǔn)菌株或臨床菌株，如ATCC、CMCC、CICC的參考菌株等。窄譜（單菌屬）鑒定板條選取至少2株；廣譜板條以企業(yè)宣稱為主，每屬選取至少1株，鑒定結(jié)果應(yīng)與已知菌相符。

臨床常見或重要菌屬（種）參考YY/T 1531 附錄A：

腸桿菌科鑒定：大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌或產(chǎn)酸克雷伯菌、普通變形桿菌或奇異變形桿菌、陰溝腸桿菌或產(chǎn)氣腸桿菌、黏質(zhì)沙雷菌；

非發(fā)酵菌鑒定：鮑曼不動(dòng)桿菌、銅綠假單胞菌、嗜麥芽窄食單胞菌；

嗜血桿菌鑒定：流感嗜血桿菌或副流感嗜血桿菌；

厭氧菌鑒定：脆弱擬桿菌；

苛養(yǎng)菌鑒定：流感嗜血桿菌。

4.4精密度

4.4.1重復(fù)性

重復(fù)性指在重復(fù)性條件下的精密度。申請人應(yīng)根據(jù)試劑板條類別，選取菌株（可使用臨床菌株，當(dāng)臨床菌株難以獲取時(shí)，可以使用標(biāo)準(zhǔn)菌株）對同一批號(hào)試劑進(jìn)行檢測，重復(fù)檢測不少于3個(gè)板條，鑒定結(jié)果應(yīng)與已知結(jié)果相符。

4.4.2中間精密度

應(yīng)考慮運(yùn)行、時(shí)間、操作者、儀器和地點(diǎn)等影響精密度的條件，設(shè)計(jì)合理的精密度試驗(yàn)方案進(jìn)行評(píng)價(jià)。

批間精密度應(yīng)用菌株（可使用臨床菌株，當(dāng)臨床菌株難以獲取時(shí)，可以使用標(biāo)準(zhǔn)菌株）對至少3個(gè)批號(hào)試劑進(jìn)行檢測，每一批號(hào)采用不少于3個(gè)鑒定板條進(jìn)行檢測，鑒定結(jié)果應(yīng)與已知結(jié)果相符。

申請人應(yīng)設(shè)定合理的精密度評(píng)價(jià)周期，具體方案可參考性能評(píng)價(jià)相關(guān)文件進(jìn)行。

用于精密度評(píng)價(jià)的臨床菌株或標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)至少包含3個(gè)菌屬（廣譜）或菌株（窄譜），每株檢測至少20次，鑒定結(jié)果應(yīng)與所用菌屬或菌株名稱相符。

5.穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究主要包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性（貨架有效期）、使用穩(wěn)定性（如適用）、運(yùn)輸穩(wěn)定性等，注冊申請人可根據(jù)實(shí)際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實(shí)施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對于實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

上述研究結(jié)果應(yīng)在說明書【儲(chǔ)存條件及有效期】項(xiàng)中載明。

6.陽性判斷值研究

生化鑒定涉及多個(gè)生化反應(yīng)指標(biāo)，其最終結(jié)果需要結(jié)合各個(gè)指標(biāo)的結(jié)果進(jìn)行綜合判斷，目前綜合判斷的方法主要包括雙歧索引法（雙歧分類法）、表解法和數(shù)值分類法等，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的特性建立合理的鑒定方法，并對相應(yīng)的鑒定方法充分的論證。

雙歧索引法（雙歧分類法）是根據(jù)細(xì)菌的主要特性和次要特性，按照“非此即彼”的原則依次往下區(qū)分，直至將細(xì)菌準(zhǔn)確區(qū)分到最小鑒定單位；表解法是通過表格的形式，列出有一定關(guān)聯(lián)性的細(xì)菌進(jìn)行相同生化試驗(yàn)的結(jié)果；數(shù)值分類法是以細(xì)菌的各種特性和反應(yīng)是同等重要的為理論基礎(chǔ)，根據(jù)每種生化反應(yīng)在不同細(xì)菌中出現(xiàn)的概率進(jìn)行全面分析而得出結(jié)果。

申請人如采用數(shù)值分類法建立鑒定可信度，應(yīng)考慮菌株的不同類別。鑒定可信度指生化鑒定結(jié)果的可信賴程度，即待測菌生化反應(yīng)譜與數(shù)據(jù)庫中建庫菌生化反應(yīng)譜的匹配程度，匹配程度越高，結(jié)果越可信，申請人應(yīng)考慮鑒定結(jié)果的可信度，可根據(jù)待測菌與數(shù)據(jù)庫匹配度給出一定的閾值，明確參數(shù)確定的依據(jù)。

本指導(dǎo)原則適用于臨床樣本中分離的純菌的鑒定，純菌的生化特征是明確的。對于手工檢測的產(chǎn)品，可直接將檢測結(jié)果與比色卡進(jìn)行對比，從而判斷鑒定結(jié)果。

（四）臨床評(píng)價(jià)資料

該產(chǎn)品列入《免于臨床試驗(yàn)體外診斷試劑目錄》，申請人應(yīng)按照《免于臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》提交臨床評(píng)價(jià)資料。如免臨床試驗(yàn)的相關(guān)指導(dǎo)原則有更新，應(yīng)符合相應(yīng)的指導(dǎo)原則要求。

申請人可將待評(píng)價(jià)試劑與境內(nèi)已上市產(chǎn)品進(jìn)行比對，證明待評(píng)價(jià)試劑與已上市產(chǎn)品實(shí)質(zhì)等同，或與參考測量程序/診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)檢測結(jié)果具有良好的一致性。此處所述實(shí)質(zhì)性等同，指預(yù)期用途相同，且具有相同的安全性與有效性。

申請人也可通過臨床試驗(yàn)的方式進(jìn)行臨床評(píng)價(jià)，臨床試驗(yàn)的倫理、方案的制定以及報(bào)告的撰寫等臨床試驗(yàn)資料均應(yīng)符合《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求，相關(guān)資料簽章應(yīng)符合《醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范》的要求。

1.對比試劑的選擇

免于臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑，如采用《免于臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》所述方式進(jìn)行方法學(xué)對比，應(yīng)通過比對分析確定與待評(píng)價(jià)試劑相適宜的境內(nèi)已上市產(chǎn)品作為對比試劑。待評(píng)價(jià)試劑與對比試劑的比對分析項(xiàng)目見表1，比對分析項(xiàng)目包括但不限于表1所列項(xiàng)目，可根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行修改。

申請人應(yīng)首先對待評(píng)價(jià)試劑與境內(nèi)已上市產(chǎn)品的預(yù)期用途進(jìn)行比對分析。預(yù)期用途是指體外診斷試劑的一般用途或功能，包括樣本類型、被測物和適應(yīng)證等。適應(yīng)證是指本產(chǎn)品治療監(jiān)測或輔助診斷的疾病或狀態(tài)，包括適用人群。

對比試劑需滿足以下條件：

境內(nèi)已經(jīng)取得上市許可；

與待評(píng)價(jià)試劑具有相同的預(yù)期用途；

優(yōu)先選擇與待評(píng)價(jià)試劑檢測結(jié)果偏差較小的試劑，不建議選擇性能劣于待評(píng)價(jià)試劑的作為對比試劑。

如通過對比分析無法證明待評(píng)價(jià)試劑與境內(nèi)已上市產(chǎn)品實(shí)質(zhì)等同，或與參考測量程序/診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)檢測結(jié)果具有良好的一致性，應(yīng)通過臨床試驗(yàn)的方式對申報(bào)試劑進(jìn)行評(píng)價(jià)。

2.試驗(yàn)地點(diǎn)

試驗(yàn)過程由申請人進(jìn)行管理并負(fù)責(zé)試驗(yàn)數(shù)據(jù)的真實(shí)性、合規(guī)性及完整性。境外申請人如需進(jìn)行中國境內(nèi)開展的方法學(xué)比對研究，應(yīng)通過其在中國的代理人在中國境內(nèi)開展試驗(yàn)。

申請人也可以提交在境外完成的試驗(yàn)資料，資料內(nèi)容應(yīng)滿足本指導(dǎo)原則的技術(shù)要求。申請人還應(yīng)充分考慮流行病學(xué)差異、受試人群的差異、使用的環(huán)境與條件差異等對研究結(jié)果產(chǎn)生的可能影響。必要時(shí)，申請人應(yīng)針對差異因素在我國境內(nèi)進(jìn)行補(bǔ)充研究。

3.試驗(yàn)人員

試驗(yàn)操作人員應(yīng)為具有相應(yīng)試驗(yàn)?zāi)芰Φ膶I(yè)技術(shù)人員，并熟悉待評(píng)價(jià)試劑和對比試劑的檢測流程。

4.試驗(yàn)樣本

應(yīng)采用與預(yù)期用途一致的來源于人體樣本（如血液、腦脊液等）分離的菌株進(jìn)行試驗(yàn)，樣本背景信息應(yīng)清晰，樣本來源應(yīng)可溯源。樣本背景信息包括但不限于：樣本來源、唯一且可追溯的編號(hào)、樣本類型和其他與該檢測相關(guān)的背景信息（如年齡、性別等）。

樣本采集方式及穩(wěn)定性應(yīng)符合待評(píng)價(jià)試劑和對比試劑說明書有關(guān)要求。

5.試驗(yàn)時(shí)間

試驗(yàn)應(yīng)考慮到臨床實(shí)際使用情況和日間精密度影響，在保證符合樣本穩(wěn)定性的條件下，設(shè)定合理的持續(xù)時(shí)間，如3～20天，應(yīng)對所有樣本進(jìn)行編盲，采用待評(píng)價(jià)試劑和對比試劑分別進(jìn)行隨機(jī)檢測，整個(gè)試驗(yàn)應(yīng)有質(zhì)量控制。

6.試驗(yàn)方法

試驗(yàn)方法可參考境內(nèi)外有關(guān)方法學(xué)比對的技術(shù)指導(dǎo)文件，并重點(diǎn)關(guān)注以下內(nèi)容。

6.1樣本要求

研究應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品鑒定板條的種類納入菌株，如廣譜鑒定板涵蓋的菌株種類較多，總體樣本例數(shù)可能高于《免于臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》規(guī)定的樣本量的要求。對于適用于革蘭陰性桿菌鑒定的廣譜鑒定板或窄譜鑒定板申請人可參考附件中革蘭陰性桿菌的相關(guān)介紹并根據(jù)產(chǎn)品預(yù)期用途納入相應(yīng)菌屬。研究樣本數(shù)量將影響可信區(qū)間寬度，擴(kuò)大樣本量，將獲得更窄的可信區(qū)間。

申請人應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的預(yù)期用途、適用人群、臨床適應(yīng)證、臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)等綜合情況，充分考慮各種影響因素，采用合理的方法確定樣本數(shù)量。

6.2數(shù)據(jù)收集期間檢查

在數(shù)據(jù)收集過程中，應(yīng)對所有數(shù)據(jù)及時(shí)記錄并檢查。如確定某些異常結(jié)果由可解釋的原因引起，應(yīng)記錄原因并將其剔除出數(shù)據(jù)分析。如不能確定原因，須將原始結(jié)果保留在數(shù)據(jù)集中。

6.3統(tǒng)計(jì)分析

6.3.1同品種方法學(xué)比對研究

申請人應(yīng)綜合考慮數(shù)據(jù)特征等因素，確定具體的統(tǒng)計(jì)分析方法，并提供其選擇依據(jù)。評(píng)價(jià)待評(píng)價(jià)試劑與對比試劑的一致性，計(jì)算待評(píng)價(jià)試劑與對比試劑的鑒定結(jié)果符合率，計(jì)算方法詳情見下表2，總體符合率95%置信區(qū)間下限應(yīng)不低于90%。

鑒定結(jié)果符合率：待評(píng)價(jià)試劑與對比試劑鑒定結(jié)果一致的樣本數(shù)占總樣本數(shù)的比例。即：鑒定結(jié)果符合率=a/n×100%。

6.3.2與參考測量程序或診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較研究

如有參考測量程序或診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)，也可參照本指導(dǎo)原則“6.3.1同品種方法學(xué)比對研究”章節(jié)相關(guān)要求，采用待評(píng)價(jià)試劑與參考測量程序或診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比對研究。參考測量程序指被接受作為提供適合其預(yù)期用途的測量結(jié)果的測量程序。診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)指使用一種方法或聯(lián)合多種方法，包括實(shí)驗(yàn)室檢測、影像學(xué)檢測、病理和隨訪信息在內(nèi)的臨床信息，來界定狀況、事件和關(guān)注特征有無的標(biāo)準(zhǔn)。

6.4不一致結(jié)果的處理

待評(píng)價(jià)試劑與對比試劑的不一致可能源于待評(píng)價(jià)試劑或?qū)Ρ仍噭┑恼`差，不一致結(jié)果可通過診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)或其他合理方法進(jìn)行確認(rèn)并分析原因，確認(rèn)結(jié)果不應(yīng)納入統(tǒng)計(jì)分析。

6.5統(tǒng)計(jì)分析中應(yīng)注意的問題

6.5.1樣本剔除應(yīng)有合理理由，不可隨意剔除。如確需剔除，應(yīng)說明剔除數(shù)量及理由。

6.5.2應(yīng)參考權(quán)威技術(shù)指南等，根據(jù)產(chǎn)品適用的統(tǒng)計(jì)分析模型，計(jì)算符合率。

臨床評(píng)價(jià)檢測菌應(yīng)充分考慮菌株類型，應(yīng)包含產(chǎn)品預(yù)期用途所涉及的菌株，對于不常見的臨床菌株可適量采用凍存菌株進(jìn)行研究。

（五）產(chǎn)品說明書和標(biāo)簽樣稿

說明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、樣本類型、檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)結(jié)果解釋以及注意事項(xiàng)等重要信息，是指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對檢驗(yàn)結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)。產(chǎn)品說明書的格式應(yīng)符合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求，進(jìn)口體外診斷試劑的中文說明書除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達(dá)習(xí)慣。產(chǎn)品說明書中相關(guān)技術(shù)內(nèi)容均應(yīng)與申請人提交的注冊申報(bào)資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨(dú)列明文獻(xiàn)的相關(guān)信息。

下面對革蘭陰性桿菌鑒定試劑說明書的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說明。

1.【預(yù)期用途】

應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

1.1該產(chǎn)品用于臨床分離的革蘭陰性桿菌的鑒定，適用范圍應(yīng)結(jié)合申報(bào)產(chǎn)品的臨床性能的確認(rèn)情況進(jìn)行描述（如：適用于革蘭陰性桿菌或某個(gè)具體種屬，需氧、兼性厭氧或厭氧等）。

1.2應(yīng)闡述與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)證及背景情況，說明相關(guān)的臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法等。

2.【檢驗(yàn)原理】

描述生化鑒定方法、原理等。

描述試劑盒的技術(shù)原理，可結(jié)合圖示進(jìn)行說明。如反應(yīng)體系中包含哪些類型的反應(yīng)（如酶活性），如何得到最終的鑒定結(jié)果。

3.【主要組成成分】

3.1詳細(xì)說明試劑盒內(nèi)各組分的名稱、數(shù)量及在反應(yīng)體系中的比例或濃度、最低分裝量等信息，如含有生物源性物質(zhì)，應(yīng)說明其生物學(xué)來源、活性及其他特性；說明不同批號(hào)試劑盒中各組分是否可以互換。

3.2試劑盒中不包含但對該項(xiàng)檢測必須的試劑組分，應(yīng)列出各試劑的產(chǎn)品名稱、注冊人（備案人）、貨號(hào)及其注冊證編號(hào)（備案編號(hào)）。

4.【儲(chǔ)存條件及有效期】

試劑盒的實(shí)時(shí)穩(wěn)定性、開封穩(wěn)定性（如適用）、運(yùn)輸穩(wěn)定性（如適用）、凍融次數(shù)要求（如涉及）等。

4.1對試劑盒的實(shí)時(shí)穩(wěn)定性、開封穩(wěn)定性（如適用）等信息做詳細(xì)介紹，包括環(huán)境溫濕度、避光條件等影響穩(wěn)定性的條件。如試劑需要配制，則應(yīng)對配制后的試劑的儲(chǔ)存條件、穩(wěn)定性做詳細(xì)介紹。

4.2如試劑盒各組分的穩(wěn)定性不一致，則應(yīng)對各組分的儲(chǔ)存條件和有效期分別進(jìn)行描述。

4.3對于可以冷凍的試劑應(yīng)注明凍融次數(shù)限制。

4.4注明生產(chǎn)日期、使用期限或失效日期（可見標(biāo)簽）。

5.【適用儀器】

說明可適用的儀器及型號(hào)，不能泛指某一系列儀器，并提供與儀器有關(guān)的信息以便用戶能夠正確選擇使用；若不同規(guī)格適用不同機(jī)型也應(yīng)說明，且應(yīng)與分析性能研究資料一致。

6.【樣本要求】

重點(diǎn)明確以下內(nèi)容

6.1樣本要求：樣本應(yīng)為臨床分離的純菌。

6.2樣本培養(yǎng)條件要求：應(yīng)注明樣本培養(yǎng)條件及時(shí)長、對于凍存菌株有無要求。

6.3樣本活化用培養(yǎng)基要求：應(yīng)注明活化菌株用培養(yǎng)基有無要求。

6.4樣本保存條件：應(yīng)注明臨床分離純菌的培養(yǎng)后保存條件。

6.5樣本制備后（菌懸液）保存條件：應(yīng)注明菌懸液保存條件。

上述描述均應(yīng)建立在相關(guān)性能評(píng)價(jià)及穩(wěn)定性研究的基礎(chǔ)上。

7.【檢驗(yàn)方法】

描述自動(dòng)分析的工作流程或者詳細(xì)說明試驗(yàn)操作的各個(gè)步驟，例如：

7.1詳細(xì)說明各試劑組分的稀釋、混合及其他必要的處理程序、試劑的使用方法（自動(dòng)/半自動(dòng)/手工）、注意事項(xiàng)等。

7.2詳細(xì)描述待測樣本菌懸液制備方法，包括步驟及注意事項(xiàng)。

7.3描述接種量：加樣濃度、體積等。

7.4描述手工或上機(jī)操作等。

7.5質(zhì)量控制方法：質(zhì)量控制的建議及相關(guān)操作步驟等。

8.【陽性判斷值】

結(jié)合陽性判斷值確定的研究資料，列出試劑的陽性判斷值，并簡要說明陽性判斷值確定的方法。

9.【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

結(jié)合臨床結(jié)果應(yīng)有明確的解釋，如出現(xiàn)異常情況，可能的原因是哪些，如何處理，應(yīng)進(jìn)行詳細(xì)描述。

10.【檢驗(yàn)方法局限性】

10.1本試劑盒的檢測結(jié)果應(yīng)結(jié)合患者的癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果等情況進(jìn)行綜合分析以及解釋，不得作為患者臨床診治或管理的唯一依據(jù)。

10.2變異的菌株可能導(dǎo)致不能正確識(shí)別。

11.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

描述產(chǎn)品性能，包括以下內(nèi)容：

11.1準(zhǔn)確性：說明準(zhǔn)確性評(píng)價(jià)結(jié)果。

11.2精密度：說明精密度的評(píng)價(jià)結(jié)果，如：重復(fù)性、中間精密度。

12.【注意事項(xiàng)】

應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

12.1如產(chǎn)品含有人源或動(dòng)物源性物質(zhì)，應(yīng)提供具有潛在傳染性的警示性信息。

12.2如產(chǎn)品出現(xiàn)某些顯性性狀時(shí)，應(yīng)提示相應(yīng)的措施，如包裝袋破損不得使用等。

12.3臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格遵守國家生物安全相關(guān)法律法規(guī)，對使用的廢棄物進(jìn)行規(guī)范處理等。

（六）質(zhì)量管理體系文件

質(zhì)量管理體系文件主要包括生產(chǎn)制造信息、質(zhì)量管理體系程序、管理職責(zé)程序、資源管理程序、產(chǎn)品實(shí)現(xiàn)程序質(zhì)量、管理體系的測量/分析/改進(jìn)程序、其他質(zhì)量體系程序信息、質(zhì)量管理體系核查文件。申請人應(yīng)按照相關(guān)法規(guī)要求建立相應(yīng)的質(zhì)量管理體系，確保產(chǎn)品在符合質(zhì)量管理體系的環(huán)境下生產(chǎn)。

三、參考文獻(xiàn)

[1]國家市場監(jiān)督管理總局.體外診斷試劑注冊與備案管理辦法:國家市場監(jiān)督管理總局令第48號(hào)[Z].

[2]國家食品藥品監(jiān)督管理總局.6840體外診斷試劑分類子目錄(2013年):國家食品藥品監(jiān)督管理總局通知242號(hào)[Z].

[3]GB/T 42062-2022,醫(yī)療器械風(fēng)險(xiǎn)管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用[S].

[4]國家藥品監(jiān)督管理局.體外診斷試劑安全和性能基本原則清單:國家藥監(jiān)局公告2021年第122號(hào)[Z].

[5]國家藥品監(jiān)督管理局.醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則:國家藥監(jiān)局公告2022年第8號(hào)[Z].

[6]國家藥品監(jiān)督管理局.醫(yī)療器械注冊自檢管理規(guī)定:國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年126號(hào)[Z].

[7]國家藥品監(jiān)督管理局.免于臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則:國家藥監(jiān)局通告2021年第74號(hào)[Z].

[8]國家藥品監(jiān)督管理局.免于臨床試驗(yàn)體外診斷試劑目錄:國家藥監(jiān)局通告2021年第70號(hào)[Z].

[9]國家藥品監(jiān)督管理局.體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則:國家藥品監(jiān)督管理局通告2021年第72號(hào)[Z].

[10]國家藥品監(jiān)督管理局,國家衛(wèi)生健康委員會(huì).醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范:國家藥品監(jiān)督管理局,國家衛(wèi)生健康委員會(huì)公告2022年第28號(hào)[Z].

[11]國家食品藥品監(jiān)督管理總局.體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則:國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號(hào)[Z].

[12]YY/T 1531-2017,細(xì)菌生化鑒定系統(tǒng)[S].

附件       

革蘭陰性桿菌及其鑒定簡介

革蘭陰性菌是指細(xì)胞壁較薄，經(jīng)革蘭染色后呈紅色的一類細(xì)菌。根據(jù)鏡下形態(tài)，可分為革蘭陰性桿菌、革蘭陰性球菌。

臨床革蘭陰性桿菌主要包括埃希菌屬、沙門菌屬、志賀菌屬、克雷伯菌屬、沙雷菌屬、變形桿菌屬、嗜血桿菌屬、假單胞菌屬、不動(dòng)桿菌屬、鮑特菌屬、軍團(tuán)菌屬、類桿菌屬、梭桿菌屬等。

埃希菌屬為兼性厭氧菌，代表菌株為大腸埃希菌；沙門菌屬為兼性厭氧菌，代表菌株為傷寒沙門菌、副傷寒沙門菌；志賀菌屬為兼性厭氧菌，代表菌株為痢疾志賀菌、福氏志賀菌、鮑氏志賀菌、宋內(nèi)志賀菌；克雷伯菌屬為需氧或兼性厭氧菌，代表菌株為肺炎克雷伯菌；沙雷菌屬為兼性厭氧菌，代表菌株為黏質(zhì)沙雷菌；變形桿菌屬為兼性厭氧菌，代表菌株為普通變形桿菌、奇異變形桿菌；嗜血桿菌屬為兼性厭氧菌，代表菌株為流感嗜血桿菌、副流感嗜血桿菌、溶血嗜血桿菌、副溶血嗜血桿菌；假單胞菌屬為需氧菌，代表菌株為銅綠假單胞菌；不動(dòng)桿菌屬為需氧菌，代表菌株為鮑曼不動(dòng)桿菌；鮑特菌屬為需氧菌，代表菌株為百日咳鮑特菌、副百日咳鮑特菌；軍團(tuán)菌屬為需氧菌，代表菌株為嗜肺軍團(tuán)菌；布魯菌屬為需氧菌，代表菌株株為布氏桿菌；類桿菌屬為厭氧菌，代表菌株為脆弱類桿菌、普通類桿菌；梭桿菌屬為厭氧菌，代表菌株為具核梭桿菌、壞死梭桿菌。

根據(jù)其對氧氣的耐受性，革蘭陰性桿菌可分為需氧型、兼性厭氧型、厭氧型，如：埃希菌屬為兼性厭氧菌、假單胞菌屬為需氧菌、類桿菌屬為厭氧菌。

革蘭陰性桿菌的鑒定是將待測樣本中革蘭陰性桿菌按其生物學(xué)特征與已知革蘭陰性桿菌進(jìn)行比對分析，確定待測樣本中革蘭陰性桿菌的分類單元。

革蘭陰性桿菌的實(shí)驗(yàn)室鑒定方法如顯微鏡法、生化法、血清學(xué)法、質(zhì)譜鑒定、分子生物學(xué)鑒定等。（1）顯微鏡法：使用顯微鏡觀察目的菌的形態(tài)、大小、染色等特征，該方法對人員的技術(shù)要求較高，且只適用于初步鑒定；（2）生化法：由于不同微生物體內(nèi)的酶系統(tǒng)、新陳代謝的類型等的不同，可導(dǎo)致其對各種物質(zhì)利用后所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物也不同，利用微生物的生理生化反應(yīng)來測定微生物的代謝產(chǎn)物，從而實(shí)現(xiàn)微生物的鑒定，此方法是微生物學(xué)中應(yīng)用較早且較廣泛的一種方法；（3）血清學(xué)：用含有已知特異性抗體的免疫血清（診斷血清）與分離培養(yǎng)出的待測樣本中純菌或樣本中的抗原進(jìn)行血清學(xué)反應(yīng)，以確定細(xì)菌的種或型；（4）質(zhì)譜鑒定：基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜，通過建立標(biāo)準(zhǔn)或已知菌的數(shù)據(jù)庫，結(jié)合儀器算法將待測樣本中細(xì)菌的蛋白峰與已知細(xì)菌比對分析，達(dá)到鑒定細(xì)菌的目的；（5）分子生物學(xué)：基于分子生物學(xué)原理，檢測方法主要包括DNA堿基比例的測定、核酸分子雜交、16s rDNA序列分析法、全基因組序列的測定等，臨床微生物鑒定應(yīng)用較多的是核酸分子雜交，根據(jù)探針特異性的不同，可以鑒定某一菌型或某一種屬甚至更大菌群，可以準(zhǔn)確、快速的進(jìn)行微生物的鑒定。（6）拉曼光譜法：細(xì)胞組成中的化合物含量不同，每種化合物都有對應(yīng)的特征光譜，應(yīng)用拉曼光譜的分析方法可以通過生成“全生物指紋”來區(qū)分不同的生物樣品，從而進(jìn)行微生物的鑒定。