環(huán)氧乙烷滅菌一直以來都是無菌醫(yī)療器械較為有效的滅菌方式，也是無菌醫(yī)療器械生產(chǎn)中至關(guān)重要的一個工藝過程。環(huán)氧乙烷滅菌可在低溫環(huán)境下（例如55°C±10°C）進行滅菌，廣泛應(yīng)用于多數(shù)不耐高溫、不耐濕的包裝材料和醫(yī)用高分子醫(yī)療器械滅菌?？谡值娜蹏妼咏?jīng)過駐極處理而帶靜電，具有粒子吸附作用。常用的輻照滅菌會破壞熔噴層的電荷結(jié)構(gòu)，影響口罩的細(xì)菌過濾效率和顆粒過濾效率，而環(huán)氧乙烷滅菌并無此影響，在口罩滅菌中具有重要性和不可替代性^[1]。

滅菌過程是無菌醫(yī)療器械生產(chǎn)中的一個特殊過程，過程確認(rèn)可以證明這一過程能夠持續(xù)且有效地生產(chǎn)出符合無菌保證水平要求的產(chǎn)品。由于滅菌設(shè)備之間存在差異，滅菌效果可能不同。因此，即使對于完全一致的滅菌過程，在不同滅菌設(shè)備上運行時，仍需要分別進行滅菌確認(rèn)^[2]。在日常生產(chǎn)中，單一柜體滅菌通常不能滿足口罩的產(chǎn)能需求，而如果要用多臺滅菌柜同時滅菌，需要多次驗證工作，周期時間過長，不具有時效性。在應(yīng)對緊急市場需求時，一方面要保證一次性使用醫(yī)用外科口罩產(chǎn)能充足，另一方面又要保證其滅菌后的無菌保證水平。為了減少在其他滅菌設(shè)備中驗證所需時間，本文依據(jù)YY/T 1268-2015 《環(huán)氧乙烷滅菌的產(chǎn)品追加和過程等效》，采用過程等效驗證的方式來實現(xiàn)。

1.材料與方法

1.1一般材料

研究起止時間：2020年12月~2022年6月。滅菌設(shè)備為同一生產(chǎn)廠家，表1為本次確認(rèn)所用的滅菌設(shè)備信息。滅 菌 劑 選 用 環(huán) 氧 乙 烷 混 合 氣 體， 質(zhì) 量 比 EO:CO₂=30%:70%。滅菌確認(rèn)微生物評估中滅菌負(fù)載產(chǎn)品為一次性醫(yī)用外科口罩（生產(chǎn)廠家：天津市遠東醫(yī)材有限公司），微生物指示劑（Microbial Indicator，BI）采用枯草芽孢桿菌ATCC9372（D值3.0min，芽孢含量2.0×106cfu/unit）。將BI放入尺寸100mm×85mm，厚0.1mm的高密度全塑袋中密封，制成外部挑戰(zhàn)裝置（External Challenge Device，PCD）^[3]。

1.2方法

選擇已經(jīng)按照GB 18279.1-2015《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌　環(huán)氧乙烷　第1部分：醫(yī)療器械滅菌過程的開發(fā)、確認(rèn)和常規(guī)控制的要求》完成了安裝確認(rèn)和運行確認(rèn)的3#滅菌設(shè)備和4#滅菌設(shè)備。按照YY/T 1268-2015 《環(huán)氧乙烷滅菌的產(chǎn)品追加和過程等效》中5.3過程等效確定。從設(shè)計和工程評估、過程分析和評估、微生物評估三個方面進行分析，評估經(jīng)4#滅菌設(shè)備確認(rèn)的滅菌參數(shù)是否可以等效到3#滅菌設(shè)備^[4]。在過程分析和評估中，在3#滅菌設(shè)備空載狀態(tài)下，分別進行各點位升溫速率和溫度分布測試分析。在滅菌設(shè)備空間中均勻放置溫度記錄儀，測溫點位和設(shè)備冷點點位如圖1所示（圖中圈出點位為冷點）。

在微生物評估中，在3#滅菌設(shè)備中滅菌負(fù)載產(chǎn)品滿載狀態(tài)下，按照圖2進行PCD擺放，采用表2中4#滅菌設(shè)備同樣的滅菌參數(shù)進行滅菌。滅菌后對PCD中的BI進行無菌檢測。

2.結(jié)果與分析

2.1設(shè)計和工程評估

2.1.1滅菌設(shè)備基本參數(shù)

所用的3#與4#環(huán)氧乙烷滅菌設(shè)備均為同一廠家制造，標(biāo)稱容積不同，表3是兩臺滅菌設(shè)備基本工程參數(shù)。兩臺設(shè)備的截面尺寸，高度相差500mm，寬度一致，截面尺寸基本相似，長度是容積的變量，均采用六面體水循環(huán)加熱。兩臺設(shè)備均采用單排托盤裝載方式，在對滅菌產(chǎn)品加熱方式上（輻射、傳導(dǎo)、對流）從中心點到加熱面的最短距離是675mm，最大距離是750~1000mm，距離相差不大。

2.1.2真空系統(tǒng)

空載時理論排空時間是評估不同容積滅菌設(shè)備配置真空泵大小的依據(jù)，此參數(shù)直接影響抽真空的速率。表4中，按照真空泵的排量和滅菌設(shè)備的容積計算在相同壓力下理論空載排空時間為4.3min和5.6min，兩臺設(shè)備的真空系統(tǒng)相差不大，在可接受范圍內(nèi)。

2.1.3加熱系統(tǒng)

滅菌設(shè)備柜內(nèi)滅菌產(chǎn)品加熱和環(huán)氧乙烷氣化器加熱均由加熱水箱提供熱量，滅菌設(shè)備采用六面體保溫設(shè)計，保溫效果良好，循環(huán)水溫度一般在50°C~55°C。表5中，兩臺設(shè)備單位容積加熱功率在2~3kW/m3，單位容積加熱功率2kW/m3足以滿足柜內(nèi)產(chǎn)品加熱和環(huán)氧乙烷氣化器加熱的要求，兩臺設(shè)備加熱控制均采用PID調(diào)節(jié)方式和自動控制系統(tǒng)，可以認(rèn)為基本等同。

2.1.4滅菌劑注入和空氣導(dǎo)入系統(tǒng)

分別對兩臺滅菌設(shè)備的滅菌劑注入管路、滅菌劑注入點位進行對比，系統(tǒng)配置信息詳見表6。兩臺設(shè)備的滅菌劑注入管路均采用Φ8mm紫銅管，能夠保證高壓液態(tài)混合氣體的流量基本穩(wěn)定且充分氣化、經(jīng)過氣化器后為直徑DN16的不銹鋼管。兩臺設(shè)備滅菌劑加注口間距在1440~1950mm，每個滅菌劑加注口所覆蓋的空間相差不大，則滅菌劑進入產(chǎn)品的分布路徑基本一致。滅菌劑注入、空氣導(dǎo)入的點位數(shù)量和管道直徑均按不同容積進行匹配，每個加注口的間距及所覆蓋的范圍和導(dǎo)入空氣點位的速率也比較接近。

2.2過程分析和評估

對兩臺滅菌設(shè)備的升溫速率、真空速率、滅菌劑注入速率三個過程參數(shù)進行過程分析和評估。

2.2.1升溫速率分析

滅菌設(shè)備空載狀態(tài)平均升溫速率數(shù)據(jù)見表7，滅菌設(shè)備冷點升溫速率見表8，3#滅菌設(shè)備平均升溫速率和冷點升溫速率均高于4#滅菌設(shè)備。從產(chǎn)品進入設(shè)備到暴露的過程中，3#可以使產(chǎn)品升溫速率更高，更容易滅菌。

2.2.2真空速率分析

通過表9可以看出兩臺滅菌設(shè)備的真空速率基本相同。滅菌過程尤其是加濕前真空度對滅菌效果影響非常大，預(yù)真空的大小決定殘留空氣的多少，而殘留空氣可直接影響環(huán)氧乙烷氣體、熱量、濕氣到達被滅菌物品的深層和腔體內(nèi)部，從而影響產(chǎn)品暴露階段的初始狀態(tài)。此外，真空速率過快可能造成對被滅菌產(chǎn)品及其包裝的破壞^[5]。

2.2.3滅菌劑注入速率分析

從表10的對比數(shù)據(jù)分析，本次評估中使用的滅菌劑為EO:CO2=30%:70%的混合氣體，每瓶凈重25kg（40L）^[5]。3#滅菌設(shè)備需要加入大約4瓶滅菌劑，4#滅菌設(shè)備加入0.5瓶滅菌劑，加注滅菌劑過程中有更換氣瓶停頓的影響，所以不同容積滅菌設(shè)備的加注滅菌劑速率計算值會有差別，但因采取了降低加注滅菌劑管徑限制液體流量的措施，保證了環(huán)氧乙烷的氣化效果，使得不同柜體的加注滅菌劑分布總體影響較小。等效評估中，在設(shè)計和工程評估通過后，通過對兩臺滅菌設(shè)備進行空載狀態(tài)的溫差分布和加熱速率、真空速率、以及滅菌劑注入速率、時間綜合分析評估，兩臺滅菌設(shè)備實施的過程評估，過程參數(shù)基本相似，可以進行微生物評估。

2.3微生物評估

采用同一滅菌負(fù)載產(chǎn)品（一次性醫(yī)用外科口罩），同一廠家滅菌劑、同一廠家滅菌生物指示劑和相同的PCD，進行滿載狀態(tài)滅菌。3#滅菌設(shè)備運行經(jīng)4#滅菌設(shè)備確認(rèn)后的一個半周期參數(shù)，對放置的PCD進行無菌檢測，結(jié)果全部滅活。

在等效評估中，影響滅菌產(chǎn)品生物負(fù)載水平的生產(chǎn)環(huán)境沒有改變；生產(chǎn)設(shè)施和滅菌場所之間的距離相同，滅菌前的轉(zhuǎn)運時間相同。因此，產(chǎn)品滅菌前的生物負(fù)載基本一致。在微生物評估過程中，運行了一個半周期，從試驗的無菌檢驗報告，可以證明在已評估的設(shè)備內(nèi)該滅菌過程有能力傳遞規(guī)定的最小無菌保證水平（SAL不超過10^-6）。

在YY/T 1268-2015《環(huán)氧乙烷滅菌的產(chǎn)品追加和過程等效》5.3.4中規(guī)定，通過設(shè)計和工程評估、過程分析和評估、微生物評估，則證明這個過程是等效的，無須進一步的鑒定。綜上分析，3#滅菌設(shè)備和4#滅菌設(shè)備對一次性使用醫(yī)用外科口罩的滅菌過程等效。此滅菌過程等效是建立在以上三個不同層級評估的基礎(chǔ)之上的，當(dāng)滅菌設(shè)備發(fā)生較大變化（如可能影響設(shè)備運行參數(shù)的維修、更換部件等）時都要進行重新確認(rèn)和評估。

3.討論

此次評估針對的是一次性醫(yī)用外科口罩產(chǎn)品做的環(huán)氧乙烷滅菌過程等效評估，該類產(chǎn)品材質(zhì)和結(jié)構(gòu)簡單，多采用透氣的紙塑包裝。若對其他組成材料、結(jié)構(gòu)或包裝復(fù)雜的產(chǎn)品建立過程等效評估，如輸液器、血液凈化體外循環(huán)管路、植入類等產(chǎn)品，在進行微生物學(xué)評估時，應(yīng)進行更全面和更嚴(yán)格的評估。此外，除評估最小無菌保證水平的傳遞，對于可能引起已鑒定的產(chǎn)品生物負(fù)載變化的因素也應(yīng)予以評估，這些變化通常有以下幾個方面：①制造環(huán)境變化，如生產(chǎn)車間潔凈空調(diào)系統(tǒng)的改變；②滅菌場所的變化；③對于委托滅菌的生產(chǎn)企業(yè)，還應(yīng)關(guān)注生產(chǎn)場地和滅菌場地之間運輸距離以及運輸條件（比如運輸時間、季節(jié)引起的溫度、濕度的不同）帶來的影響^[6]。

對于無菌醫(yī)療器械，產(chǎn)品無菌性至關(guān)重要。滅菌過程作為無菌醫(yī)療器械生產(chǎn)中的特殊過程，是企業(yè)生產(chǎn)過程控制和政府監(jiān)管的重點。通過滅菌過程等效驗證可以縮短滅菌確認(rèn)所需的時間，減少重復(fù)性的確認(rèn)工作，提高效率滿足市場需求。但同時也要充分考慮其關(guān)鍵控制點，全面評估由此帶來的產(chǎn)品風(fēng)險^[7]。

參考文獻

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[2] 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局,中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會.醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌　環(huán)氧乙烷　第1部分:醫(yī)療器械滅菌過程的開發(fā)、確認(rèn)和常規(guī)控制的要求:GB 18279.1-2015[S].2015.

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[6] 翟建紅.影響環(huán)氧乙烷滅菌濕度的季節(jié)因素分析[J].護理研究,2014,28(12):1436-1437.[7] 唐劍,姚鵬.無菌醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)滅菌控制常見缺陷分析及監(jiān)管要點梳理[J].中國食品藥品監(jiān)管,2019,17(10):41-45.

【文章來源】中國醫(yī)療器械信息