附件：腫瘤標志物類定量檢測試劑注冊審查指導原則（2023年修訂版）（2024年第1號）.doc

腫瘤標志物類定量檢測試劑注冊審查
指導原則（2023年修訂版）

本指導原則旨在指導注冊申請人對腫瘤標志物類定量檢測試劑注冊申報資料的準備及撰寫，同時也為技術審評部門提供參考。

本指導原則是對腫瘤標志物類定量檢測試劑的一般要求，注冊申請人應依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用。若不適用，需具體闡述理由及相應的科學依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進行充實和細化。

本指導原則是供注冊申請人和技術審評人員使用的指導性文件，但不包括審評審批所涉及的行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，應在遵循相關法規(guī)的前提下使用本指導原則。如果有能夠滿足相關法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細的研究資料和驗證資料。

本指導原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標準體系以及當前認知水平下制定，隨著法規(guī)和標準的不斷完善，以及科學技術的不斷發(fā)展，相關內(nèi)容也將適時進行調(diào)整。

一、適用范圍

腫瘤標志物類定量檢測試劑是指利用各種方法學對人血清、血漿或其他體液中的腫瘤標志物進行體外定量分析的試劑。

從方法學考慮，本指導原則主要指利用基于抗原抗體反應原理的免疫學方法對腫瘤標志物進行定量檢測的體外診斷試劑，如酶聯(lián)免疫法、化學發(fā)光法等，而不包括組織受體檢測、生物化學方法、免疫組化染色法、分子生物學方法類檢測試劑，有利之處可參考執(zhí)行。

本指導原則僅適用于對惡性腫瘤患者進行動態(tài)監(jiān)測以輔助判斷疾病進程或治療效果的定量檢測試劑注冊申請和變更注冊申請的情形，如產(chǎn)品用于其它用途,應根據(jù)相關用途開展相關臨床研究。本指導原則針對腫瘤標志物類定量檢測試劑注冊申報資料中的部分內(nèi)容進行撰寫，其他未盡事宜應當符合《關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告》等相關法規(guī)要求。

二、注冊審查要點

（一）監(jiān)管信息

1.產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品名稱應符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》及相關法規(guī)的要求，如甲胎蛋白檢測試劑盒（化學發(fā)光免疫分析法）。

2.分類依據(jù)

根據(jù)《6840體外診斷試劑分類子目錄(2013版)》《體外診斷試劑分類規(guī)則》《國家藥監(jiān)局關于調(diào)整

3.其他信息還包括產(chǎn)品列表、關聯(lián)文件、申報前與監(jiān)管機構的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。

（二）綜述資料

綜述資料主要包括概述、產(chǎn)品描述、預期用途、申報產(chǎn)品上市歷史及其他需說明的內(nèi)容。建議申請人對以下幾方面內(nèi)容進行著重介紹：

1.概述

明確腫瘤標志物類定量檢測試劑的通用名稱及確認依據(jù)，明確產(chǎn)品的管理類別及分類編碼。

2.產(chǎn)品描述

詳述檢測原理、產(chǎn)品主要研究結果的總結和評價、與同類和/或前代產(chǎn)品的比較等。與同類和/或前代產(chǎn)品的比較，應著重從方法學、檢驗原理、產(chǎn)品主要性能等方面詳細說明申報產(chǎn)品與目前市場上已獲批同類產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。

3.預期用途

詳述申報產(chǎn)品的預期用途，應與管理類別具有一致性。

（三）非臨床資料

1.產(chǎn)品技術要求及檢驗報告

1.1產(chǎn)品技術要求

注冊申請人應當在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、前期評價等結果，依據(jù)國家標準、行業(yè)標準及有關文獻資料，結合產(chǎn)品特性按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術要求編寫指導原則》的要求編寫。作為第三類體外診斷試劑管理的腫瘤標志物類定量檢測試劑，還應當以附錄形式明確主要原材料以及生產(chǎn)工藝要求。

1.2檢驗報告

有適用國家標準品的，技術要求中應體現(xiàn)國家標準品的相關要求并使用國家標準品進行檢驗。

第三類體外診斷試劑應當提供三個不同生產(chǎn)批次產(chǎn)品的檢驗報告。

2.分析性能研究

注冊申請人應采用在符合質(zhì)量管理體系的環(huán)境下生產(chǎn)的試劑盒進行所有分析性能研究，包括具體研究方法、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計方法等詳細資料。分析性能研究試驗方法可參考《定量檢測體外診斷試劑分析性能評估注冊審查指導原則》、美國臨床實驗室標準化協(xié)會批準指南（CLSI-EP）等國內(nèi)外有關體外診斷產(chǎn)品性能評估的指導原則進行。

腫瘤標志物類定量檢測試劑的分析性能一般包括樣本穩(wěn)定性，適用的樣本類型，校準品的量值溯源和質(zhì)控品的賦值，正確度，精密度，空白限、檢出限及定量限，分析特異性，高劑量鉤狀效應，測量區(qū)間及可報告區(qū)間，反應體系等。產(chǎn)品的準確度與正確度和精密度有關。申請人應設計合理的試驗方案，對各項分析性能進行充分評估。

2.1樣本穩(wěn)定性

樣本穩(wěn)定性一般包括樣本各種實際運輸及儲存（常溫、冷藏和冷凍）條件下的保存期限驗證，以確認樣本的保存條件及保存時間?？梢栽诤侠淼臏囟确秶鷥?nèi)，每間隔一定的時間段即對儲存樣本進行驗證，從而確認不同類型樣本的穩(wěn)定性。可冷凍保存的樣本還應對凍融次數(shù)進行合理驗證。

2.2適用的樣本類型

如果試劑適用于多種樣本類型（包括抗凝劑），應采用合理方法評價每種樣本類型的適用性。對具有可比性的樣本類型，如血清和血漿樣本，可選擇具有統(tǒng)計學意義數(shù)量的樣本進行樣本一致性的同源比對研究；對于不具有可比性的樣本類型，應對每種樣本類型分別進行分析性能評估。

如果樣本的采集、處理方式存在差別，例如適用不同采樣器、不同樣本保存液等處理方法，應分析這些差別的潛在影響，并進行針對性的分析性能驗證。

2.3校準品的量值溯源和質(zhì)控品的賦值（如適用）

應明確申報產(chǎn)品適用的校準品和質(zhì)控品。

如申報產(chǎn)品包括校準品，應當提交溯源資料。

如申報產(chǎn)品包括質(zhì)控品，應當提交在所有適用機型上進行賦值和驗證的資料。

2.4正確度

正確度評價方法包括使用參考物質(zhì)的正確度評價、方法學比對、回收試驗等方法，企業(yè)可根據(jù)實際情況選擇合理方法進行研究。

2.4.1使用參考物質(zhì)的正確度評價

參考物質(zhì)的值可作為參考量值，用于評估試劑檢測結果的偏倚。推薦的參考物質(zhì)包括：具有互換性的有證參考物質(zhì)，公認的參考品、標準品，參考測量程序賦值的臨床樣本。不可采用產(chǎn)品校準品、申報試劑檢測系統(tǒng)定值的質(zhì)控品進行正確度評價。

建議采用2～3個水平的參考物質(zhì)，代表試劑測量區(qū)間內(nèi)的不同濃度，其中應包括參考區(qū)間上限附近的濃度。進行多次重復檢測，采用檢測結果平均值與參考量值計算偏倚。如參考物質(zhì)只有1個水平，且無合理稀釋方法，亦可在說明原因的基礎上，僅采用1個水平的參考物質(zhì)進行正確度評價。

2.4.2方法學比對

采用申報試劑與合理的比較測量程序同時檢測臨床樣本，通過兩者的比對研究和偏倚估計，進行申報試劑的正確度評價。比較測量程序可選擇同類試劑或者參考測量程序。臨床樣本的濃度水平應覆蓋申報試劑的測量區(qū)間。在性能建立時，建議對每個樣本重復檢測，以平均值或中位數(shù)進行回歸分析，并評價參考區(qū)間上限濃度的偏倚。在實施方法學比對前，應分別對申報試劑和比較測量程序進行初步評估，只有在確認兩者都分別符合各自相關的質(zhì)量標準后方可進行比對試驗。

2.4.3回收試驗

對于缺少具有互換性的有證參考物質(zhì)，公認的參考品、標準品，及參考測量程序，且無已上市同類試劑，同時可獲得與被測量一致的純品的試劑，可采用回收試驗進行正確度評價。

使用純品配制標準溶液A時，宜采用重量法，以減小配制過程中的不確定度。應注意基質(zhì)效應，盡量采用與臨床待測樣本接近的基質(zhì)。選擇合適濃度的臨床樣本作為B液。將不同體積量的標準溶液A加入樣本B中，配制成至少3個不同濃度的回收樣品，每個濃度重復檢測3次，計算平均回收率。

需注意，一般標準溶液的加入體積不超過總體積的10%。至少一份回收樣本的分析物濃度在參考區(qū)間上限附近。

2.5精密度

應根據(jù)各測量條件對檢測結果影響程度的分析，設計合理的精密度試驗方案進行評價，包括重復性、實驗室內(nèi)精密度、實驗室間精密度和批間精密度，應制定合理的精密度評價標準，如標準差或變異系數(shù)等。

精密度研究用樣本一般為臨床實際檢測樣本或其混合物。樣本濃度一般包括測量區(qū)間高、中、低在內(nèi)的3～5個水平，應有參考區(qū)間上限濃度附近的樣本。

2.6空白限、檢出限及定量限

腫瘤標志物定量檢測體外診斷試劑對樣本濃度下限的檢出能力指標包括空白限（LoB）、檢出限（LoD）及定量限（LoQ）。

2.6.1空白限、檢出限及定量限的建立

LoB、LoD、LoQ的建立需分別選擇多個獨立的樣本（空白樣本、低濃度水平樣本、已知濃度的低水平樣本），在多天內(nèi)進行研究。

LoB一般由多個獨立的空白樣本（無分析物）的檢測結果計算獲得。

LoD一般由多個獨立的低濃度（含有分析物）樣本的檢測結果，結合LoB進行計算獲得。

應根據(jù)具體產(chǎn)品的原理、檢測結果差異和數(shù)據(jù)分布，選擇合理的試驗方案和統(tǒng)計分析方法。

LoQ應滿足預設準確度指標，即考慮偏倚和精密度的要求。偏倚可通過檢測具有可接受參考量值的樣本進行評估，所以需獲得已知濃度的低水平樣本，例如本文2.4.1中所述參考物質(zhì)。如涉及將樣本稀釋至低濃度水平，應確保稀釋過程不引起明顯的基質(zhì)效應，且在低濃度區(qū)間呈線性。精密度的評估可根據(jù)檢測試劑及其應用確定其測量條件，一般應至少包括重復性和日間精密度。

對于無法獲得參考物質(zhì)的腫瘤標志物，如無法在合適的低水平分析物濃度下確定偏倚，可采用其他合理的替代方法評估LoQ，例如研究試劑精密度達到特定要求時的最低分析物濃度。建議僅在無法確定偏倚時采用替代方法，并且應設置較為嚴格的精密度要求。

2.6.2空白限、檢出限及定量限的驗證

LoB、LoD、LoQ的驗證需各選擇至少2個樣本（空白樣本、檢出限濃度樣本、定量限濃度樣本），在多天內(nèi)進行試驗。每個試劑批次至少需要獲得20個檢測結果，計算符合要求的檢測結果比例，如果比例符合統(tǒng)計學要求/預設的臨界值，則2.6.1建立的LoB、LoD、LoQ得到驗證。企業(yè)可參考相關文件，根據(jù)申報產(chǎn)品特性制定檢測結果比例要求。一般來講，LoB總是低于LoD，而LoD則低于或等于LoQ。

2.7分析特異性

分析特異性受干擾和交叉反應的影響。申請人應根據(jù)產(chǎn)品特點,分析待測樣本中及試劑使用過程中潛在的干擾物質(zhì)和交叉反應物質(zhì)。

2.7.1干擾試驗

可采用添加干擾物質(zhì)的樣本進行研究，如果干擾物質(zhì)的基質(zhì)與適用樣本不同，則添加量宜少于總體積的5%（溶解度允許條件下），并盡量使用接近體內(nèi)循環(huán)形式的樣品或純品。

比較添加與未添加高濃度干擾物質(zhì)的樣本檢測結果的差異。如果差異超出接受范圍或對臨床有顯著性影響，可確認該物質(zhì)為干擾物質(zhì)，應評估該干擾物質(zhì)濃度與干擾程度之間的關系；如果差異在接受范圍內(nèi)或對臨床無顯著性影響，可認為該濃度的物質(zhì)不產(chǎn)生干擾，應明確不產(chǎn)生干擾的物質(zhì)濃度上限。

在對可疑干擾物質(zhì)進行干擾篩查或驗證時，建議采用至少2個分析物水平的樣本，應包括參考區(qū)間上限附近濃度的樣本。

在評估干擾物質(zhì)濃度與干擾程度之間關系時，可適當增加樣本數(shù)量，納入更多分析物水平的樣本。

申請人除按照上述方法采用添加干擾物質(zhì)的樣本進行研究外，亦可采用有代表性的患者樣本，通過申報試劑與不受該干擾物影響的測量程序檢測結果間的比對，進行干擾物質(zhì)研究。

常見的內(nèi)源性干擾物質(zhì)包括溶血（血紅蛋白）、高脂、高膽紅素、自身抗體(如RF、ANA)、生物素、人抗鼠抗體，近期使用的抗腫瘤藥物（如某些生物制劑），應研究其對檢測結果的影響。

2.7.2交叉反應

建議選擇高濃度的交叉反應物質(zhì)進行驗證，并應提供用于交叉反應驗證物質(zhì)的來源、制備、濃度等基本信息。

常見的交叉反應物質(zhì)包括樣本中存在的某些與待測抗原有相似化學結構或抗原表位的分子，可能與試劑中的單克隆抗體發(fā)生交叉反應而影響檢測結果的物質(zhì)，如易共存的其他腫瘤標志物抗原、某些激素等，可根據(jù)產(chǎn)品特性，選擇交叉物質(zhì)進行研究。

企業(yè)可自行根據(jù)產(chǎn)品原理，選擇與申報產(chǎn)品臨床適應證相關的藥物進行研究，如可能與分析物發(fā)生作用的藥物、影響反應體系的藥物等。

2.8高劑量鉤狀效應

檢測含有極高濃度的待測抗體/抗原的樣本時，飽和反應可能導致檢測濃度值低于真實值。建議對多個含有高濃度分析物的樣本進行梯度稀釋后由低濃度至高濃度檢測，每個梯度的稀釋液重復多份進行檢測，明確不產(chǎn)生鉤狀效應的最高分析物濃度。

2.9測量區(qū)間及可報告區(qū)間

2.9.1線性區(qū)間及測量區(qū)間

線性區(qū)間的研究，需采用高值和零濃度/低值樣本配制一系列不同濃度的樣本。樣本基質(zhì)應盡可能與臨床實際檢測的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度接近預期測定上限的混合人體樣本，且應充分考慮多倍稀釋對樣本基質(zhì)的影響。

當建立試劑的線性區(qū)間時，需配制較預期線性區(qū)間更寬的9個左右不同濃度的樣本（不包括零濃度樣本），每個樣本進行多次重復檢測，根據(jù)可接受線性偏差和各濃度的重復性，確定檢測次數(shù)。采用重復檢測均值和預期值進行直線回歸分析，建議采用加權最小二乘回歸等分析方法，提供散點圖、線性回歸方程、線性相關系數(shù)（r）及線性偏差，判斷結果是否滿足可接受標準。

當驗證試劑的線性區(qū)間時，需配制覆蓋整個線性區(qū)間的至少5個不同濃度的樣本，每個樣本至少重復檢測2次。

測量區(qū)間，也稱分析測量區(qū)間，在該區(qū)間內(nèi)，臨床樣本在未經(jīng)稀釋、濃縮，或非常規(guī)測量程序中步驟的其他前處理情況下，檢測結果的線性偏差、不精密度和偏倚均在可接受范圍內(nèi)。測量區(qū)間下限為定量限，線性區(qū)間包含測量區(qū)間。

2.9.2可報告區(qū)間

如對超出測量區(qū)間濃度的樣本可進行稀釋后檢測，應研究合適的稀釋液和稀釋倍數(shù)，從而確定試劑的可報告區(qū)間。

2.10其他需注意問題

如果試劑適用不同的機型，需要在不同機型上分別進行分析性能評估。應采用一個或多個機型，進行充分的試劑分析性能建立研究，對于其他機型，應分析各適用機型的工作原理、檢測方法、反應條件控制、信號處理等，如基本相同，可基于風險分析對已建立的分析性能指標進行合理驗證。所有適用機型驗證的分析性能應基本一致，如不同機型對某一檢測項目的某一分析性能存在差異，應針對該差異采用不同機型進行充分的分析性能建立研究。

2.11反應體系研究

管理類別為第三類的腫瘤標志物定量檢測試劑應提交反應體系研究資料，第二類試劑由申請人保存，技術審評需要時應提交。

2.11.1確定抗原抗體反應條件（溫度、時間等）的研究資料。

2.11.2確定反應所需物質(zhì)用量（校準品、樣本、包被物、酶標物、底物等）的研究資料；如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進行處理后方可用于最終檢測，申請人還應對樣本稀釋液及其用量、其他必要的處理方法等進行研究。

2.11.3底物（發(fā)光或變色）的最適條件研究。

2.11.4其他：如清洗次數(shù)（如適用）、基質(zhì)液的選擇、樣本稀釋等。

2.11.5不同適用機型的反應條件如果有差異應分別詳述。

3.穩(wěn)定性研究

穩(wěn)定性研究主要包括實時穩(wěn)定性（貨架有效期）、使用穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性等，申請人可根據(jù)實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應包括研究方法的確定依據(jù)、具體方法及過程。對于實時穩(wěn)定性研究，應提供至少3批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

4.參考區(qū)間研究

詳述參考區(qū)間建立或驗證的方法或依據(jù)，明確研究采用的樣本來源及信息、詳細的試驗資料、統(tǒng)計方法等。樣本選擇應根據(jù)產(chǎn)品的預期用途，考慮不同年齡、性別、地域等因素的影響，盡可能考慮樣本來源的多樣性、代表性。使用適用的統(tǒng)計學方法確定擬申報試劑的參考區(qū)間，可參考《體外診斷試劑參考區(qū)間確定注冊審查指導原則》進行研究。

5.其他資料

管理類別為第三類的腫瘤標志物定量檢測試劑應提交主要原材料及生產(chǎn)工藝研究資料，第二類試劑由申請人保存，技術審評需要時應提交。

5.1主要原材料研究資料

此類產(chǎn)品的主要原材料研究包括抗原、抗體、校準品、質(zhì)控品等資料，應提供主要原材料的選擇與來源、制備、質(zhì)量控制標準等相關研究資料。

5.1.1抗原或抗體

詳述抗原/抗體所針對的抗原表位、抗原/抗體制備所用免疫原以及確定該抗原/抗體作為主要原材料的依據(jù)，提交抗原/抗體來源、制備、篩選、鑒定及質(zhì)量控制標準（可包括外觀、蛋白濃度、純度、分子量、效價、功能性試驗等）等詳細試驗資料。

5.1.2其他

除上述原材料外，產(chǎn)品中包含的其他原材料，如磁微粒、BSA等，均應進行驗證并提交相關資料。明確供應商和質(zhì)量控制標準。

5.1.3對于校準品、質(zhì)控品，還應列明校準品、質(zhì)控品的成分、基質(zhì)及各水平濃度。

5.2生產(chǎn)工藝研究資料

5.2.1主要生產(chǎn)工藝介紹，可以圖表方式表示。

5.2.2反應原理（如雙抗體夾心法）介紹。

5.2.3固相載體的包被、顯色（發(fā)光）系統(tǒng)的確定、結合物的制備等研究資料。

（四）臨床評價資料

屬于《免于臨床試驗體外診斷試劑目錄》的腫瘤標志物定量檢測試劑，可通過同品種方法學比對研究進行臨床評價，評價方法可參照《免于臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價技術指導原則》相關內(nèi)容，如相關法規(guī)、文件有更新，臨床評價應符合更新后的要求。

不屬于《免于臨床試驗體外診斷試劑目錄》的腫瘤標志物定量檢測試劑，應通過臨床試驗方式進行臨床評價，臨床評價資料應符合《體外診斷試劑臨床試驗技術指導原則》的要求。

對于有已上市同類產(chǎn)品的臨床試驗，應選擇境內(nèi)已批準上市、臨床普遍認為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為對比試劑，進行試驗體外診斷試劑與對比試劑的比對研究，證明與已上市產(chǎn)品的一致性。臨床研究的受試人群應為該產(chǎn)品的預期人群，具有與該標志物相關惡性腫瘤的臨床背景信息。對于定量檢測，應針對主要評價指標進行樣本量估算。臨床試驗方案中建議同時給出與所選定評價指標對應的臨床可接受標準，并提供確定依據(jù)。在線性范圍內(nèi)的各個濃度水平均應有一定量的入組樣本例數(shù)。定量檢測的體外診斷試劑臨床試驗評價指標通常包括回歸分析的回歸系數(shù)、截距、相關系數(shù)和決定系數(shù)等。采用Bland-Altman法，計算一致性限度，評價兩種檢測結果的一致性。一致性限度應在臨床所能接受的界值范圍內(nèi)。

對于全新腫瘤標志物定量檢測的臨床試驗，應包含不少于100例受試者的縱向研究，建議參考《體外診斷試劑臨床試驗技術指導原則》進行研究。

（五）產(chǎn)品說明書和標簽樣稿

產(chǎn)品說明書格式應滿足《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》的要求。產(chǎn)品說明書中技術內(nèi)容應與注冊申報資料中的相關研究結果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻，應以規(guī)范格式進行標注，并單獨列明文獻的相關信息。腫瘤標志物定量檢測試劑說明書編寫應重點關注以下內(nèi)容：

1.【預期用途】

1.1首段明確申報產(chǎn)品用于體外定量檢測血清、血漿和/或其他體液中的某腫瘤標志物濃度，主要用于對惡性腫瘤患者進行動態(tài)監(jiān)測以輔助判斷疾病進程或治療效果，不能作為惡性腫瘤早期診斷或確診的依據(jù)，不用于普通人群的腫瘤篩查。

1.2簡單介紹該腫瘤標志物的特征，如分子結構、分子量、產(chǎn)生和代謝主要途徑、半衰期等。

1.3腫瘤標志物水平升高常見于哪些良惡性疾病，組織/器官特異性如何，其升高或降低可能有哪些醫(yī)學解釋。

1.4預期用途項下的背景信息應與預期用途一致，如申報產(chǎn)品預期用途不包含“診斷”“篩查”用途，則不得出現(xiàn)“診斷”“篩查”等誤導性表述。

2.【主要組成成分】

2.1說明試劑盒包含組分的名稱、數(shù)量及各組分主要成分的比例或濃度等信息，如果對于正確的操作很重要，應提供其生物學來源、活性及其他特性；如適用，明確說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換。

2.2試劑盒內(nèi)如包含校準品和/或質(zhì)控品，應說明其主要組成成分及其生物學來源，校準品應注明其定值及溯源性，質(zhì)控品應有合適的靶值范圍，如靶值范圍為批特異，可注明批特異，并附單獨的靶值。

2.3試劑盒中不包含但對該項檢測必須的組分，企業(yè)應列出相關試劑的名稱、貨號及其他相關信息。

3.【樣本要求】

重點明確以下內(nèi)容：樣本類型、處理、保存期限、保存條件（短期、長期）等。如有血漿樣本，應注明對抗凝劑的要求。冷藏/冷凍樣本檢測前是否需恢復室溫，凍融次數(shù)。應詳細描述對特殊體液標本的采集條件、保存液、容器等可能影響檢測結果的要求。

4.【適用機型】

說明適用的儀器及其型號，并提供與儀器有關的信息以便用戶能夠正確選擇使用。

5.【檢驗方法】

詳細說明試驗操作的各個步驟，包括：

5.1試劑使用方式、注意事項。

5.2試驗條件：溫度、時間、儀器波長等以及試驗過程中的注意事項。

5.3校準：校準品的使用方法、注意事項、校準曲線的繪制（如適用）。

對需專用儀器的產(chǎn)品，應注明推薦的儀器校準周期。

5.4質(zhì)量控制：質(zhì)控品的使用方法、對質(zhì)控結果的必要解釋以及推薦的質(zhì)控周期等；建議在本部分注明以下字樣：如果質(zhì)控結果與預期不符，提示檢測結果不可靠，不應出具檢測報告。如質(zhì)控不合格應提供相關的解決方案。

6.【產(chǎn)品性能指標】詳述以下性能指標：

6.1空白限、檢出限和定量限：明確空白限、檢出限和定量限，簡要介紹確定方法。

6.2測量區(qū)間：說明本試劑盒可達到的線性區(qū)間、測量區(qū)間或可報告區(qū)間，儀器報告結果的高限和低限要求（如有）等。

6.3精密度：簡要說明精密度評價的方法和結果。

6.4特異性：明確有關干擾或交叉反應的研究結果。常見的特異性研究包括：對溶血、高脂、黃疸等干擾因子研究（結果應量化表示，禁用輕度、嚴重等模糊表述），有關自身抗體、易共存或結構相似的不同腫瘤標志物間、抗腫瘤藥物特異性（如某些生物制劑）的研究等，如未進行相關研究也應提供相關警示說明。

6.5鉤狀效應：說明不會產(chǎn)生鉤狀效應的濃度上限或相關研究，如需稀釋，應注明對稀釋液的要求、最佳或最大稀釋比例。

6.6正確度：簡要介紹正確度所采用的方法和結果。

6.7概括描述臨床評價（包括免于臨床試驗的臨床評價和臨床試驗）的方法和結果。

6.8建議采用國際標準濃度單位表示腫瘤標志物濃度，如涉及不同單位，如U/mL、ng/mL、mg/L等，應注明不同單位間的換算關系。

7.【參考區(qū)間】

應注明常用樣本類型的參考區(qū)間，簡單介紹建立和/或驗證該參考區(qū)間所選健康人群的基本信息，包括：樣本量、參考人群特征（如性別、年齡、種族等）和采用的統(tǒng)計學方法。建議注明以下字樣“由于地理、人種、性別及年齡等差異，建議各實驗室建立自己的參考區(qū)間”。

8.【注意事項】應至少包括以下內(nèi)容：

8.1本試劑盒的檢測結果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應結合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應等情況綜合考慮。

8.2由于方法學或抗體特異性等原因，使用不同生產(chǎn)商的試劑對同一份樣本進行腫瘤標志物檢測可能會得到不同的檢測結果，因此，在腫瘤監(jiān)測過程中，用不同試劑檢測所得結果不應直接相互比較，以免造成錯誤的醫(yī)學解釋；建議實驗室在發(fā)給臨床醫(yī)生的檢測報告中注明所用試劑特征。系列監(jiān)測中如果改變試劑類型，則應進行額外的連續(xù)性檢測并與原有試劑結果進行平行比較以重新確定基線值。

8.3有關人源組分的警告，如：試劑盒內(nèi)的質(zhì)控品、校準品或其他人源組分，雖已經(jīng)通過了HBs-Ag、HIV1/2-Ab、HCV-Ab等項目的檢測，但截至目前，沒有任何一項檢測可以確保絕對安全，故仍應將這些組分作為潛在傳染源對待。

8.4樣本：對所有樣本和反應廢棄物都應視為傳染源對待。

8.5其他有關不同腫瘤標志物特性的注意事項。

三、名詞解釋

1.腫瘤標志物：是指在惡性腫瘤發(fā)生和增殖過程中,由腫瘤細胞產(chǎn)生或機體反應而異常產(chǎn)生和/或升高的，反映腫瘤細胞特性的一類物質(zhì)。

2.正確度：指無窮多次重復測量所得量值的平均值與一個參考量值間的一致程度。

3.精密度：在規(guī)定條件下，相互獨立的測試結果之間的一致程度。精密度的程度是用統(tǒng)計學方法得到的測量不精密度的數(shù)字形式表示，如標準差（SD）和變異系數(shù)（CV）。

4.空白限：指測量空白樣本時可能觀察到的最高測量結果。

5.檢出限：由給定測量程序得到的測得量值，對于此值，在給定聲稱物質(zhì)中存在某成分的誤判概率為α時，聲稱不存在該成分的誤判概率為β。

6.定量限：指達到預設準確度要求時可測量的最低分析物濃度。

7.線性：指給出與樣品中被測量的值直接成比例的測得量值的能力。

8.線性區(qū)間：在這個區(qū)間內(nèi)，測量結果充分地符合一條合適的直線。

9.干擾：是由一個影響量引起的測量的系統(tǒng)效應，該影響量自身不在測量系統(tǒng)中產(chǎn)生信號，但它會引起示值的增加或減少。

10.交叉反應：指不是分析物的物質(zhì)與試劑反應的程度。

11.高劑量鉤狀效應：是指在免疫化學測量程序中由相對抗體濃度抗原濃度過量或相對抗原濃度抗體濃度過量時的抗原-抗體免疫復合物減少而引起的負偏倚。

四、參考文獻

[1]國家市場監(jiān)督管理總局.體外診斷試劑注冊與備案管理辦法.國家市場監(jiān)督管理總局令第48號[Z].

[2]國家藥品監(jiān)督管理局.關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告.國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第122號[Z].

[3]國家藥品監(jiān)督管理局.關于發(fā)布免于臨床試驗體外診斷試劑目錄的通告.國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第74號[Z].

[4]國家藥品監(jiān)督管理局.定量檢測體外診斷試劑分析性能評估注冊審查指導原則.國家藥監(jiān)局器審中心通告2022年第32號[Z]

[5]國家藥品監(jiān)督管理局.體外診斷試劑參考區(qū)間確定注冊審查指導原則.國家藥監(jiān)局器審中心通告2022年第36號.[Z]

[6] GB/T 29791.1-2013，體外診斷醫(yī)療器械制造商提供的

信息（標示）第1部分：術語、定義和通用要求[S].

[7] CLSI. User Verification of Precision and Estimation of

Bias; Approved Guideline—Third Edition. CLSI document EP15-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2014.

[8] CLSI. Measurement Procedure Comparison and Bias

Estimation Using Patient Samples. 3rd ed. CLSI guideline EP09c. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2018.

[9] CLSI. Evaluation of Precision of Quantitative

Measurement Procedures; Approved Guideline—Third Edition. CLSI document EP05-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2014.

[10] CLSI. Evaluation of Linearity of Quantitative

Measurement Procedures. 2nd ed. CLSI guideline EP06. Clinical and Laboratory Standards Institute; 2020.

[11] CLSI. Evaluation of Detection Capability for Clinical

Laboratory Measurement Procedures; Approved Guideline—Second Edition. CLSI document EP17-A2. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2012.

[12] CLSI. Interference Testing in Clinical Chemistry. 3rd

ed. CLSI guideline EP07. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2018.

[13] Guidance Document for the Submission of Tumor

Associated Antigen Premarket Notifications, [510(k)], to FDA，F(xiàn)DA, USA Setember 19, 1996.

[14] Practice Guidelines and Recommendations for Use of

Tumor Markers in the Clinic，the National Academy of Clinical Biochemistry, European Group on Tumor Marker, Volume 15，2002.