附件：糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑注冊審查指導(dǎo)原則（2022年第35號）.doc

糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑注冊審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門審評注冊申報資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中的具體內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特征對注冊申報資料的內(nèi)容進行充實和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是供注冊申請人和技術(shù)審評人員使用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊審批等行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)、國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進行調(diào)整。

一、適用范圍

糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑是指用于體外定量檢測人糞便中鈣衛(wèi)蛋白含量的試劑。

本指導(dǎo)原則僅適用于以酶標(biāo)記、(電)化學(xué)發(fā)光標(biāo)記、(時間分辨)熒光標(biāo)記等標(biāo)記方法，以微孔板 、管、磁顆粒、微珠和塑料珠等為載體的定量檢測糞便中鈣衛(wèi)蛋白含量的免疫分析試劑。

根據(jù)《體外診斷試劑分類規(guī)則》，糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑管理類別為Ⅱ類，分類編碼為6840。

其他方法學(xué)產(chǎn)品根據(jù)實際情況可參考本指導(dǎo)原則的有關(guān)內(nèi)容。

二、注冊審查要點

（一）監(jiān)管信息

1.產(chǎn)品名稱的要求

試劑名稱由三部分組成：被測物名稱、用途、方法或原理。

2.分類編碼

根據(jù)《體外診斷試劑分類規(guī)則》，糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑管理類別為Ⅱ類，分類編碼為6840。

3.包裝規(guī)格和實例

注明可測試的樣本數(shù)或裝量，如××測試/盒、××人份/盒、××mL，除國際通用計量單位外，其余內(nèi)容均應(yīng)采用中文進行表述。

4.產(chǎn)品儲存條件及有效期

對試劑盒的效期穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性等信息做詳細(xì)介紹，包括環(huán)境溫濕度、避光條件等影響穩(wěn)定性的條件。

5.主要組成成分

說明產(chǎn)品包含試劑組分的名稱、數(shù)量、每個組成成分在反應(yīng)體系中的比例或濃度、其生物學(xué)來源、活性及其他特性。

6.方法原理

詳細(xì)說明檢驗原理、方法，應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品主要組成成分、被測物和產(chǎn)物的關(guān)系進行描述。

7.預(yù)期用途

詳細(xì)說明試劑盒用于體外定量測定人糞便中鈣衛(wèi)蛋白的含量，可輔助臨床診斷/鑒別診斷××疾病。

（二）綜述資料

1.預(yù)期用途及臨床適應(yīng)證

綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性方面說明、產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)評價、同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容，其中同類產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從方法學(xué)、臨床應(yīng)用情況、申報注冊產(chǎn)品與目前市場上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的異同方面進行介紹，應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》相關(guān)要求。

2.主要原材料研究資料(如需提供)

2.1主要原材料的選擇、制備、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及試驗驗證研究資料。

檢測試劑所用抗體的制備、篩選、純化以及鑒定等詳細(xì)試驗資料。如抗體為申請人自制，則應(yīng)詳述抗體的名稱及生物學(xué)來源，申請人對該抗體技術(shù)指標(biāo)的要求(如外觀、純度、蛋白濃度、效價等)，且其生產(chǎn)工藝必須相對穩(wěn)定，并對其工藝有相關(guān)的驗證。同時確定該抗體作為主要原材料的依據(jù)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);如為申請人外購，則應(yīng)詳述其名稱及生物學(xué)來源，供應(yīng)商名稱，提交供應(yīng)商出具的抗體性能指標(biāo)及檢驗報告，詳述申請人對該抗體技術(shù)指標(biāo)的要求以及申請人確定該抗體作為主要原材料的依據(jù)。供應(yīng)商應(yīng)相對固定。

其他主要原材料的選擇及驗證資料，如硝酸纖維素膜、膠體金、反應(yīng)緩沖液等，申請人應(yīng)詳述每一原材料技術(shù)指標(biāo)的要求以及確定該原材料作為主要原材料的依據(jù)，確定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。若為外購，應(yīng)提供供應(yīng)商名稱并提交出具的檢驗報告。

2.2質(zhì)控品、校準(zhǔn)品的原料選擇、制備、定值過程及試驗資料。

2.3校準(zhǔn)品的溯源性文件，包括具體溯源鏈、試驗方法、數(shù)據(jù)及統(tǒng)計分析等詳細(xì)資料。申請人應(yīng)根據(jù)GB/T21415/ ISO17511《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》提供所用校準(zhǔn)品的來源、賦值過程和相應(yīng)指標(biāo)，以及不確定度等內(nèi)容。

3.主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料(如需提供)

3.1主要生產(chǎn)工藝的介紹，可以流程圖方式表示，并簡要說明主要生產(chǎn)工藝的確定方法，如各組分制備的工藝、試劑的配方及工藝關(guān)鍵參數(shù)的確定等。申請人應(yīng)采用經(jīng)過驗證，能夠保證產(chǎn)品質(zhì)量的生產(chǎn)工藝。

3.2反應(yīng)體系主要包括：樣本采集及處理、樣本要求，確定反應(yīng)校準(zhǔn)品、樣本和試劑的用量，反應(yīng)條件(緩沖體系、濃度、時間、溫度、波長等條件)的確認(rèn)資料及試驗數(shù)據(jù)，校準(zhǔn)方法、質(zhì)控方法等。

3.3不同適用機型的反應(yīng)條件如果有差異應(yīng)分別闡述。

(三)非臨床資料

1.分析性能評估資料

申請人應(yīng)當(dāng)提交對申報試劑進行性能驗證的研究資料，對于每項分析性能的評價都應(yīng)包括具體的研究項目、試驗設(shè)計、研究方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計方法(如有)、研究結(jié)論等詳細(xì)資料。性能評估時建議將試劑和所選用的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品作為一個整體進行評價，評估整個系統(tǒng)的性能是否符合要求。有關(guān)分析性能驗證的背景信息也應(yīng)在申報資料中有所體現(xiàn)，包括試驗地點、適用儀器(名稱、型號、校準(zhǔn)有效期)、試劑材料(名稱、規(guī)格、批號、儲存溫度、有效期)及所選用的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品、臨床樣本來源等。

對于本試劑(盒)，建議著重對以下分析性能進行研究：

1.1空白限、檢出限

申請人可參考國際或國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的文件確定糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑盒的空白限、檢出限及參考區(qū)間等相關(guān)信息。

空白限：一般由多個空白樣本的檢測結(jié)果，經(jīng)計算獲得。如雙抗體夾心法的試劑盒，可測定20份空白樣本，計算空白均值(M)和標(biāo)準(zhǔn)差(SD)，以M+2SD報告方法的空白限。

檢出限：一般由多個低濃度(含有分析物)樣本的檢測結(jié)果，結(jié)合空白限進行計算獲得，應(yīng)根據(jù)具體產(chǎn)品的原理、檢測結(jié)果差異和分布，選擇合適的模型和分析方法(非參數(shù)/參數(shù)數(shù)據(jù))進行計算。

空白限及檢出限的驗證：申請人可根據(jù)具體產(chǎn)品預(yù)先設(shè)定一個濃度作為檢出限，配制5份濃度近似檢出限的低值樣本進行檢測，每份樣本檢測5次，對檢測結(jié)果按照大小進行排序，當(dāng)?shù)陀谏暾埲颂峁┑目瞻紫迶?shù)值的檢測結(jié)果數(shù)量小于或等于3個時，即可認(rèn)為申請人預(yù)先設(shè)定檢出限符合要求，如不符合，申請人需調(diào)整預(yù)設(shè)的檢出限濃度，直至符合該條件。

注：空白樣本應(yīng)不含被測物，但其基質(zhì)應(yīng)與待測定常規(guī)樣本相同。或根據(jù)測定項目選用相應(yīng)基質(zhì)的樣本，但應(yīng)注意將基質(zhì)效應(yīng)減至最小。不同方法學(xué)原理，選擇適用的方法研究計算其空白限、檢出限。

1.2線性范圍

建立試劑線性范圍所用的樣本基質(zhì)應(yīng)盡可能與臨床實際檢測的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測定上限的混合人源樣本，且應(yīng)充分考慮多倍稀釋對樣本基質(zhì)的影響。建立線性范圍時，需在預(yù)期測定范圍內(nèi)選擇7—11個濃度水平。例如，將預(yù)期測定范圍加寬至130%，在此范圍內(nèi)選擇更多的濃度水平，然后依據(jù)試驗結(jié)果逐漸減少數(shù)據(jù)點直至表現(xiàn)出線性關(guān)系，以確定線性范圍。

驗證線性范圍時，以接近線性范圍上限的高濃度樣本和接近線性范圍下限的低濃度樣本，混合成至少5個稀釋濃度(xi)。分別測試樣本，每個稀釋濃度測試3次，分別求出測定結(jié)果的均值(yi)。以稀釋濃度(xi)為自變量，以測定結(jié)果均值(yi)為因變量求出線性回歸方程，并計算線性相關(guān)系數(shù)(r)。線性范圍及線性相關(guān)系數(shù)應(yīng)符合申請人給定值。將稀釋濃度(xi)代入線性回歸方程，計算yi的估計值及yi與估計值的絕對偏差或相對偏差，應(yīng)符合申請人給定要求。

1.3精密度(含批間差)

精密度(precision)是指在規(guī)定條件下，對同一或類似被測對象重復(fù)測量所得標(biāo)示值或測量值間的一致程度。精密度由隨機測量誤差決定，通常用標(biāo)準(zhǔn)差、方差或變異系數(shù)表示。精密度包括重復(fù)性、中間精密度和再現(xiàn)性。申請人可以遵循國內(nèi)外相關(guān)指南文件方法評估糞便鈣衛(wèi)蛋白測量的精密度，應(yīng)覆蓋可報告范圍并包括醫(yī)學(xué)決定水平。如果精密度測試不是在宣稱的樣本基質(zhì)中進行的，需闡述所使用的研究方法并解釋選擇研究樣本基質(zhì)的原因。其中，如果研究過程中包括提取步驟，建議使用可報告范圍的低值和高值完成該過程的再現(xiàn)。

申請人需要對可能影響檢測精密度的主要變量進行驗證，應(yīng)對檢測時間、分析儀、操作者、地點、檢測輪次等要素進行相關(guān)的驗證。研究過程至少應(yīng)包括：說明樣本的類型(如基質(zhì)、來源、制備過程)、測試的天數(shù)、試驗次數(shù)以及觀察次數(shù)、接受標(biāo)準(zhǔn)、測試地點以及測試結(jié)果的統(tǒng)計分析。

應(yīng)至少考慮批內(nèi)及批間重復(fù)性，結(jié)果應(yīng)符合申請人給定要求。

1.4準(zhǔn)確度

1.4.1相對偏差法：采用具有互換性的有證參考物質(zhì)/公認(rèn)的參考品、標(biāo)準(zhǔn)品，參考測量程序/參考方法賦值的臨床樣本。參考物質(zhì)的值可作為參考量值，評估試劑檢測結(jié)果的偏倚。應(yīng)采用至少兩個水平的參考物質(zhì)，代表試劑測量范圍的高、低濃度，進行重復(fù)檢測(至少3～5重復(fù))，結(jié)果應(yīng)符合申請人給定要求。

1.4.2回收試驗法：向不同糞便樣本中添加已知量的糞便鈣衛(wèi)蛋白，測量并計算回收百分比。測試樣本的濃度應(yīng)覆蓋測量范圍的重要部分，并包括臨床決定水平。同時應(yīng)評估提取步驟對回收率的影響?；厥赵囼炛兄辽賾?yīng)包括：樣品的目標(biāo)濃度和測定方法、回收過程中的提取步驟、計算回收率的定義及方法(包括測試的重復(fù)次數(shù)等)以及研究結(jié)果，結(jié)果應(yīng)符合申請人給定要求。

1.4.3比對試驗

采用參考方法或國內(nèi)/國際普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的已上市同類試劑作為參比方法，與擬申報試劑同時檢測一批臨床樣品(至少40例樣本)，擬申報試劑與參比試劑相關(guān)系數(shù)r及偏倚應(yīng)符合申請人給定要求。

在實施方法學(xué)比對前，應(yīng)分別對擬申報試劑和比對試劑進行初步評估，只有在確認(rèn)兩者都分別符合各自相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)后方可進行比對試驗。方法學(xué)比對時應(yīng)注意質(zhì)量控制、樣本類型、濃度分布范圍并對結(jié)果進行合理的統(tǒng)計學(xué)分析。

1.5分析特異性

1.5.1干擾物質(zhì)：糞便鈣衛(wèi)蛋白的潛在干擾源包括通常在糞便中可能存在的物質(zhì)，比如微生物、口服藥物、營養(yǎng)補充劑或血紅蛋白等，申請人應(yīng)對所有潛在的干擾因素進行分析性能研究。干擾物濃度的分布應(yīng)覆蓋人體樣本生理及病理狀態(tài)下可能出現(xiàn)的物質(zhì)濃度。建議將研究結(jié)果在說明書中進行說明。如無法獲得含有高濃度干擾物質(zhì)的樣本，可采用純品物質(zhì)分別添加到健康人樣本、參考區(qū)間附近樣本、中濃度值樣本中的方式進行驗證。如試驗涉及向患者樣本中添加潛在干擾物，需測試干擾樣本的回收率，與未添加干擾樣本的偏差應(yīng)符合申請人規(guī)定要求。干擾研究應(yīng)包括以下內(nèi)容：干擾物的類型及水平、添加或不添加干擾物時糞便鈣衛(wèi)蛋白的濃度、偏差的計算方法及公式、干擾試驗結(jié)果的接受標(biāo)準(zhǔn)。

1.5.2交叉反應(yīng)：應(yīng)通過測試其他胃腸道疾病(如乳糜瀉等)患者樣本的交叉反應(yīng)性來評估分析特異性。

1.6其他需注意問題

1.6.1對于適用多個機型的產(chǎn)品，應(yīng)提供產(chǎn)品說明書【適用機型】項中所列的所有型號儀器的性能評估資料。對于某些性能，可采用主機型進行充分的性能研究，其他機型采用驗證的試驗方案進行。但對于主機型的判斷，應(yīng)有充分依據(jù)。

1.6.2如有多個包裝規(guī)格，需要對不同包裝規(guī)格之間的差異進行分析或驗證，如不同包裝規(guī)格產(chǎn)品間存在性能差異，需要提交采用每個包裝規(guī)格產(chǎn)品進行分析性能評估的資料。如不同包裝規(guī)格之間不存在性能差異，申請人需要提交包裝規(guī)格之間不存在性能差異的分析，可僅選擇代表規(guī)格進行分析性能評估。

1.6.3針對技術(shù)要求中所列性能指標(biāo)，應(yīng)當(dāng)對多批(至少三批)產(chǎn)品進行分析評估，并對結(jié)果進行統(tǒng)計分析。其他性能指標(biāo)的評估申請人可結(jié)合自身產(chǎn)品特點確定評估批次/數(shù)量。

1.6.4校準(zhǔn)品溯源及質(zhì)控品賦值(如適用)

應(yīng)參照GB/T 21415《體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》的要求，提供申請人(工作)校準(zhǔn)品及試劑盒配套校準(zhǔn)品定值及不確定度的研究資料，提供質(zhì)控品賦值及其靶值范圍確定的研究資料。

1.6.5校準(zhǔn)品及質(zhì)控品性能評估(如適用)

如注冊單元中包含校準(zhǔn)品或質(zhì)控品，建議應(yīng)對其性能進行評估應(yīng)至少包含外觀、裝量、準(zhǔn)確度、均一性。

1.6.6生物安全性(如適用)

試劑盒如含人源性成分，至少使用經(jīng)過國家批準(zhǔn)合格的人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒、丙型肝炎病毒抗體診斷試劑盒、乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒、梅毒螺旋抗體診斷試劑盒，對該申報試劑盒(包括校準(zhǔn)品、質(zhì)控品)進行檢測，檢測結(jié)果應(yīng)均為陰性。

2.參考區(qū)間確定資料

應(yīng)提交建立/驗證參考區(qū)間確定的方法和依據(jù)，說明確定參考區(qū)間所采用的樣本來源，并提供參考區(qū)間研究的詳細(xì)試驗資料、統(tǒng)計方法等。應(yīng)考慮產(chǎn)品實際定位臨床適應(yīng)證，使用目標(biāo)疾病和非目標(biāo)疾病受試者的樣本結(jié)果來建立/驗證設(shè)立的參考區(qū)間。明確參考人群的納入、排除標(biāo)準(zhǔn)，離群值的處理，考慮不同年齡、性別等因素，盡可能考慮樣本來源的多樣性、代表性，樣本例數(shù)應(yīng)符合統(tǒng)計學(xué)要求。

建議申請人根據(jù)臨床需要，參考《臨床實驗室檢驗項目參考區(qū)間的制定》或其他權(quán)威文件采用合適的統(tǒng)計學(xué)方法進行分析。

3.穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究可參考YY/T 1579《體外診斷醫(yī)療器械體外診斷試劑穩(wěn)定性評價》的相關(guān)要求進行研究。主要涉及申報試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究兩部分內(nèi)容。前者主要包括實時穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性、開瓶(復(fù)溶)穩(wěn)定性、溶解后凍存穩(wěn)定性(若涉及)等研究，申請人可根據(jù)實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的試驗方案、過程、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對于實時穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的穩(wěn)定性研究資料。如產(chǎn)品包含校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，應(yīng)提供相應(yīng)穩(wěn)定性試驗研究資料。

樣本穩(wěn)定性研究主要依據(jù)申請人宣稱的儲存條件下開展有效性驗證，可以在合理的溫度范圍內(nèi)選擇溫度點(如溫度范圍較寬，應(yīng)選擇多個溫度點，并考慮極端條件)，每間隔一定的時間段即對儲存樣本進行穩(wěn)定性驗證，如果樣本涉及提取過程，建議考慮提取前、后樣本的儲存時間和溫度以及評估是否存在性能差異。

試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內(nèi)容的研究結(jié)果均應(yīng)在說明書【儲存條件及有效期】和【樣本要求】兩項中進行詳細(xì)說明。

4.產(chǎn)品風(fēng)險分析資料

對體外診斷試劑產(chǎn)品生命周期的各個環(huán)節(jié)，從產(chǎn)品設(shè)計開發(fā)、原材料的采購控制、生產(chǎn)、預(yù)期用途、可能的使用錯誤、與安全性有關(guān)的特征、已知和可預(yù)見的危害等方面的判定以及對患者風(fēng)險的估計進行風(fēng)險分析、風(fēng)險評價和相應(yīng)的風(fēng)險控制基礎(chǔ)上，形成風(fēng)險管理報告。應(yīng)符合YY/T 0316《醫(yī)療器械風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》的要求。

5.產(chǎn)品技術(shù)要求

產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》和《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫注冊審查指導(dǎo)原則》的相關(guān)規(guī)定。申請人應(yīng)按照相關(guān)要求編寫產(chǎn)品技術(shù)要求，內(nèi)容主要包含產(chǎn)品性能指標(biāo)和檢驗方法。

產(chǎn)品作為定量試劑，技術(shù)要求性能指標(biāo)應(yīng)至少包括外觀、裝量、準(zhǔn)確度、檢出限、線性、重復(fù)性、批間差。

6.產(chǎn)品注冊檢驗報告

根據(jù)《體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式》的要求，有適用國家標(biāo)準(zhǔn)品的，應(yīng)當(dāng)使用國家標(biāo)準(zhǔn)品對產(chǎn)品進行檢驗?？商峤灰韵氯我恍问降臋z驗報告：

(1)申請人出具的自檢報告。

(2)委托有資質(zhì)的醫(yī)療器械檢驗機構(gòu)出具的檢驗報告。

(四)臨床評價資料

此項目暫未列入國家藥監(jiān)局關(guān)于發(fā)布免于臨床試驗體外診斷試劑目錄的通告《免于臨床試驗體外診斷試劑目錄》的范疇。根據(jù)體外診斷試劑臨床評價的相關(guān)要求，申請人可按照《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》要求進行臨床試驗。如臨床試驗的相關(guān)指導(dǎo)原則有更新，應(yīng)符合相應(yīng)的指導(dǎo)原則要求。

下面僅對臨床評價中的重點問題進行闡述。

1.對比方法的選擇

申請人可以選擇與境內(nèi)已上市同類產(chǎn)品進行比較研究試驗，證明兩者具有等效性。應(yīng)選擇目前臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的產(chǎn)品作為參比試劑，同時應(yīng)充分了解參比試劑的技術(shù)信息，包括方法學(xué)、臨床預(yù)期用途、主要性能指標(biāo)、校準(zhǔn)品的溯源情況、推薦的參考區(qū)間等，應(yīng)提供已上市產(chǎn)品的境內(nèi)注冊信息及說明書。

申請人也可選擇參考方法(如內(nèi)窺鏡檢查)進行比較研究試驗，考察待評價試劑與參考方法的符合率/一致性。當(dāng)與臨床診斷進行比較時，應(yīng)對研究進行設(shè)計，證明試驗結(jié)果與IBD的存在/不存在的關(guān)系，及與其他胃腸道情況(臨床敏感性和特異性)相比之間的關(guān)聯(lián)。

注：上述兩種研究結(jié)果，均應(yīng)表明目標(biāo)人群中糞便鈣衛(wèi)蛋白水平升高的發(fā)生率與已發(fā)表的文獻相似。

若申請人使用已上市的同類產(chǎn)品進行比較試驗，如果申報產(chǎn)品與已上市產(chǎn)品在方法學(xué)或其他技術(shù)方面差異較大時，建議采用臨床診斷金標(biāo)準(zhǔn)(如內(nèi)窺鏡檢查)進行比較試驗。

2.研究對象的選擇

2.1總體要求

考慮申報產(chǎn)品實際的臨床定位適應(yīng)證來選擇具有特定癥狀/體征人群作為研究對象，明確樣本的納入/排除標(biāo)準(zhǔn)。申請人在建立病例納入標(biāo)準(zhǔn)時，應(yīng)考慮到不同人群的差異，盡量覆蓋各類適用人群(建議以臨床狀態(tài)IBD、IBS、其他胃腸道疾病等)、不同年齡及性別等人群。

2.2樣本類型的考慮

試驗中，盡可能使用新鮮樣本，避免貯存。

3.統(tǒng)計學(xué)分析

對臨床試驗結(jié)果的統(tǒng)計應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計方法，如相關(guān)分析、Bland-Altman分析、線性回歸、配對t檢驗等。建議統(tǒng)計學(xué)負(fù)責(zé)人選擇合理的統(tǒng)計學(xué)方法進行分析，統(tǒng)計分析應(yīng)可以證明兩種方法的檢測結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異。在臨床研究方案中應(yīng)明確統(tǒng)計檢驗假設(shè)，即評價考核試劑與參比試劑是否等效的標(biāo)準(zhǔn)。

4.結(jié)果差異樣本的驗證

對于比較研究試驗中測定結(jié)果不符的樣本，應(yīng)采用“金標(biāo)準(zhǔn)”或其他合理的方法進行復(fù)核，以便對臨床試驗結(jié)果進行分析。如無需復(fù)核，應(yīng)詳細(xì)說明理由。

(五)產(chǎn)品說明書和標(biāo)簽樣稿

說明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、檢驗原理、檢驗方法、樣本要求、檢測結(jié)果解釋以及注意事項等重要信息，是指導(dǎo)使用者正確操作、臨床醫(yī)生針對檢驗結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)，因此，產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。

產(chǎn)品說明書的編寫應(yīng)符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》的要求，境外試劑的中文說明書除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達習(xí)慣。產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均應(yīng)與申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致。

根據(jù)《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》的要求并結(jié)合糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑盒本身的特點，對試劑說明書的重點內(nèi)容進行詳細(xì)說明。

1.【產(chǎn)品名稱】

1.1通用名稱：試劑名稱由三部分組成：被測物名稱、用途、方法或原理。例如：糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑盒(熒光免疫層析法)。

1.2英文名稱(如有)應(yīng)當(dāng)正確、完整，可直譯，不宜只寫縮寫。

2.【包裝規(guī)格】

注明可測試的樣本數(shù)或裝量，如××測試/盒、××人份/盒、××mL，除國際通用計量單位外，其余內(nèi)容均應(yīng)采用中文進行表述。如產(chǎn)品有不同組分,可以寫明組分名稱。如有貨號，可增加貨號信息。

3.【預(yù)期用途】

3.1第一段詳細(xì)說明試劑盒用于體外定量測定人糞便中鈣衛(wèi)蛋白的含量，可輔助臨床診斷/鑒別診斷××疾病。

3.2應(yīng)闡述與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)證及背景情況，說明相關(guān)的臨床或?qū)嶒炇以\斷方法等。

注：臨床適應(yīng)證相關(guān)信息應(yīng)提供文獻出處(標(biāo)注并在【參考文獻】列出)，且應(yīng)與產(chǎn)品的實際定位及臨床試驗的實際情況相對應(yīng)。

4.【檢驗原理】

詳細(xì)說明檢驗原理、方法，必要時可采用圖示方法描述。檢測原理的描述應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品主要組成成分、被測物和產(chǎn)物的關(guān)系進行描述。

5.【主要組成成分】

5.1說明產(chǎn)品包含試劑組分的名稱、數(shù)量、每個組成成分在反應(yīng)體系中的比例或濃度、其生物學(xué)來源、活性及其他特性。

5.2對于多組分試劑應(yīng)明確說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換。如可互換，應(yīng)提交相關(guān)驗證材料。

5.3如試劑盒中包含耗材，應(yīng)列明耗材名稱、數(shù)量等信息。

5.4對于產(chǎn)品中不包含，但對該試驗必需的試劑組分，應(yīng)列出此類試劑的名稱，提供稀釋或混合方法及其他相關(guān)信息。

5.5試劑盒中如包含校準(zhǔn)品和/或質(zhì)控品，應(yīng)說明其主要組成成分及其生物學(xué)來源，注明校準(zhǔn)品的定值及其溯源性，溯源性應(yīng)寫明溯源到的最高級別。質(zhì)控品的靶值范圍。如靶值范圍為批特異，可注明批特異，并附單獨的靶值單。

6.【儲存條件及有效期】

6.1對試劑盒的效期穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性等信息做詳細(xì)介紹，包括環(huán)境溫濕度、避光條件等影響穩(wěn)定性的條件。如注冊單元含校準(zhǔn)品或質(zhì)控品且其形態(tài)為干粉(包含試劑為凍干粉狀態(tài))，則應(yīng)對復(fù)溶后的儲存條件、穩(wěn)定性做詳細(xì)介紹。如試劑需要配制，則應(yīng)對配制后的試劑的儲存條件、穩(wěn)定性做詳細(xì)介紹。

6.2保存溫度不應(yīng)有模糊表述，如“常溫”“室溫”，應(yīng)直接以℃為單位。小于3個月的穩(wěn)定期建議應(yīng)以日為單位，大于或等于3個月的穩(wěn)定期限建議以月為單位。

6.3如試劑盒各組分的穩(wěn)定性不一致，則應(yīng)對各組分的儲存條件和有效期分別進行描述。

6.4對于可以冷凍的試劑應(yīng)注明凍融次數(shù)限制。

6.5注明生產(chǎn)日期、使用期限或失效日期(可見標(biāo)簽)。

7.【適用儀器】

說明可適用的儀器及型號，應(yīng)寫明具體適用儀器的型號，不能泛指某一系列儀器。適用儀器需寫明廠家及型號，如不同包裝規(guī)格適用于不同的機型，寫明適用關(guān)系，且與分析性能評估資料一致。

8.【樣本要求】

8.1明確本產(chǎn)品適用的樣本類型，

8.2樣本采集：采集時間點是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響，盡量減少由于樣本采集或處理不當(dāng)對試驗造成的影響。

8.3樣本處理、運送及保存：明確樣本處理方法、樣本的保存條件及期限(短期、長期)，運輸條件等。冷藏/冷凍樣本檢測前是否須恢復(fù)室溫，凍融次數(shù)的要求。如有需要，應(yīng)對高于檢測范圍樣本的稀釋方法進行規(guī)定。

8.4特殊體液標(biāo)本還應(yīng)詳細(xì)描述對采集條件、保存液、容器要求等可能影響檢測結(jié)果的要求。應(yīng)對已知的干擾物進行說明，同時列出干擾物的具體濃度。

8.5應(yīng)與樣本穩(wěn)定性的研究一致。

9.【檢驗方法】

為保證試劑的正確性，應(yīng)在以下幾個方面對試驗操作的每一步驟進行詳細(xì)說明，包括：

9.1試劑配制：詳細(xì)說明各試劑組分的稀釋、混合及其他必要的處理程序、試劑的使用方法(手工/半自動/全自動)、注意事項等。

9.2試驗條件：如pH值、溫度、每一步試驗所需的時間、測定主/副波長、試劑用量、樣本用量、測定方法、最終反應(yīng)產(chǎn)物的穩(wěn)定性等。待測樣品的預(yù)處理方法、試驗過程中的注意事項。

9.3校準(zhǔn)程序(如需要)：校準(zhǔn)品的使用方法、步驟、注意事項，校準(zhǔn)有效期及需要重新校準(zhǔn)的情況。對于適用于手工/半自動儀器的試劑(盒)產(chǎn)品，應(yīng)說明校準(zhǔn)曲線的繪制方法。

9.4質(zhì)量控制程序：質(zhì)控品的使用方法、質(zhì)量控制方法，對質(zhì)控結(jié)果的必要解釋以及推薦的質(zhì)控周期等。

9.5試驗結(jié)果的計算或讀取，應(yīng)包括對每個系數(shù)及每個計算步驟的解釋，如果可能舉例說明。

10.【參考區(qū)間】

結(jié)合參考區(qū)間確定的研究資料，列出糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑(盒)的參考區(qū)間，并簡要說明參考區(qū)間確定的方法，如樣本量、人群、年齡、統(tǒng)計方法等。建議注明“由于地理、人種、性別及年齡等差異，建議各實驗室建立自己的參考區(qū)間”。

11.【檢驗結(jié)果的解釋】

應(yīng)根據(jù)其臨床意義對可能出現(xiàn)的結(jié)果進行合理的解釋。

說明試劑盒的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查等情況綜合考慮。

說明在何種情況下應(yīng)對樣本進行重復(fù)測試，以及在重復(fù)測試時需要采取的樣本處理方式。

超出檢測范圍的樣本怎樣報告結(jié)果，如要得到準(zhǔn)確的結(jié)果需怎樣處理，如需稀釋，應(yīng)注明稀釋方法、最佳或最大稀釋比例等。

12.【檢驗方法的局限性】

12.1本試劑的檢測結(jié)果僅供參考，不得作為臨床診治的唯一依據(jù)，對患者的臨床管理應(yīng)結(jié)合其癥狀、體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。

12.2由于骨髓抑制導(dǎo)致粒細(xì)胞減少的患者可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

12.3一些服用非甾體抗炎藥(NSAID)的患者糞便鈣衛(wèi)蛋白水平會升高。

12.4結(jié)果可能不適用于糞便鈣衛(wèi)蛋白水平輕度升高的2歲以下兒童。

12.5IBD患者在疾病的活動期(炎癥期)和非活動期之間波動。在解釋糞便鈣衛(wèi)蛋白測定結(jié)果時，必須考慮這些階段。

12.6其他腸道疾病，包括許多胃腸道感染和結(jié)直腸癌、克羅恩病等，可導(dǎo)致鈣衛(wèi)蛋白水平升高。因此，活動性IBD的診斷應(yīng)僅在其他診斷測試和患者總體臨床狀況的背景下進行。

12.7糞便鈣衛(wèi)蛋白是糞便中中性粒細(xì)胞存在的指標(biāo)，對IBD沒有特異性。

12.8說明可能對試驗結(jié)果產(chǎn)生影響的其他因素，明確常見干擾物質(zhì)對檢測結(jié)果的影響，申請人可根據(jù)自身情況，結(jié)合分析性能評估中的干擾試驗進行說明，結(jié)果應(yīng)量化表示，不應(yīng)使用模糊的描述方式。

13.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

與技術(shù)要求中主要性能指標(biāo)保持一致，應(yīng)至少包括：檢出限、準(zhǔn)確度、線性、重復(fù)性、批間差等。

14.【注意事項】

14.1僅用于體外診斷。

14.2本試劑的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。

14.3使用不同生產(chǎn)商的試劑對同一份樣本進行檢測可能會存在差異。

14.4說明對所有樣本和反應(yīng)廢棄物都應(yīng)視為傳染源對待，廢棄物應(yīng)當(dāng)按當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置等。

14.5有關(guān)人源組分的警告，如：試劑盒內(nèi)的質(zhì)控品、校準(zhǔn)品或其他人源組分，雖已經(jīng)通過了HBs-Ag、HIV1/2-Ab、HCV-Ab、TP等項目的檢測，但截至目前，沒有任何一項檢測可以確保絕對安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對待。

14.6采用不同方法學(xué)的試劑檢測所得結(jié)果不應(yīng)直接相互比較，以免造成錯誤的醫(yī)學(xué)解釋。

14.7有關(guān)試驗操作、樣本保存及處理等其他注意事項。

15.【標(biāo)識的解釋】

如有圖形或符號，請解釋其代表的意義?？蓞⒖枷嚓P(guān)標(biāo)準(zhǔn)：YY/T 0466.1。

16.【參考文獻】

注明引用的參考文獻，并在說明書相應(yīng)內(nèi)容處標(biāo)注參考文獻編號。參考文獻的格式應(yīng)規(guī)范。

17.【基本信息】

根據(jù)《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》的要求編寫。

18.【醫(yī)療器械注冊證編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號】

注明該產(chǎn)品的注冊證編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號。

19.【說明書核準(zhǔn)日期及修改日期】

注明該產(chǎn)品說明書的核準(zhǔn)日期。如曾進行過說明書的變更申請，還應(yīng)該同時注明說明書的修改日期。

(六)質(zhì)量管理體系-產(chǎn)品具體實施信息

1.詳述產(chǎn)品的生產(chǎn)過程，提供生產(chǎn)工藝流程圖。

2.明確特殊過程和關(guān)鍵工序，提供特殊過程的確認(rèn)資料以及關(guān)鍵工序的驗證資料。如各種工作液的配制、標(biāo)記物的制備、校準(zhǔn)品/質(zhì)控品的制備等。

3.明確產(chǎn)品生產(chǎn)的質(zhì)量控制過程，如關(guān)鍵物料的檢驗、半成品的檢驗、成品的檢驗等。

4.主要原材料的選擇、制備、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及試驗驗證研究資料。

三、參考文獻

[1]醫(yī)療器械監(jiān)督管理條例[Z].

[2]體外診斷試劑注冊與備案管理辦法[Z].

[3]醫(yī)療器械說明書和標(biāo)簽管理規(guī)定[Z].

[4]關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則的通告[Z].

[5]關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告[Z].

[6]關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式公告[Z].

[7] GB/T 21415，體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性[S].

[8] WS/T 416，干擾實驗指南[S].

[9] WS/T 402，臨床實驗室檢驗項目參考區(qū)間的制定[S].

[10] YY/T 1579，體外診斷醫(yī)療器械體外診斷試劑穩(wěn)定性評價[S].

[11] YY/T 0316，醫(yī)療器械風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用[S].